Nové farmakologické intervence ovlivňující příjem potravy se zaměřením na anorexigenní neuropeptidy: peptid CART (cocaine-and amphetamine-regulated transcript) a peptid uvolňující prolaktin (PrRP)

Abstract

Dizertační práce je zaměřena na charakterizaci biologické aktivity dvou nedávno objevených anorexigenních neuropeptidů: peptidu CART (cocaine- and amphetamine-regulated transcript) a peptidu uvolňujícího prolaktin (PrRP). Strukturně-aktivitní studie fragmentů reprezentujících různé části CART(61-102) charakterizovala jak jejich vazbu k feochromocytomálním buňkám PC12, tak jejich schopnost ovlivnit příjem potravy. Výsledky ukázaly, že pro uchování biologické aktivity peptidu CART je nezbytná kompaktní struktura obsahující disulfidické můstky. V druhé části práce byl prokázán synergistický účinek periferně podaného CCK a centrálně podaného peptidu CART na příjem potravy u hladových myší. Anorexigenní účinek peptidu CART byl zvýšen podprahovou dávkou CCK, zatímco antagonista receptoru CCK1 účinek blokoval. Ve třetí části práce byl testován příjem potravy po simultánním podání orexigenního neuropeptidu Y s peptidem CART nebo CCK jak u štíhlých myší, tak u myší obézních po působení glutamátem sodným (MSG). U obézních MSG myší s lézemi v nucleu arcuatu bylo prokázáno, že anorexigenní účinek centrálně podaného peptidu CART zůstává zachován, zatímco periferně podaný CCK u těchto myší na příjem potravy nepůsobí z důvodu nefunkční signalizace leptinu. V závěrečné části byla ve třech hypofyzárních buněčných...

The thesis was focused on characterization of biological activities of two recently discovered anorexigenic neuropeptides: CART (cocaine- and amphetamine- regulated transcript) peptide and prolactin-releasing peptide (PrRP). In order to find a pharmacophore of CART peptide, shorter fragments of CART(61- 102) peptide were tested for binding to PC12 cells and nhibition of food intake in fasted mice. The results showed that a compact structure of CART peptide containing three disulphide bridges is necessary for preservation of its full biological activity. In the second part of the thesis, synergistic and long-lasting effect of centrally administered peptide CART and peripherally administered cholecystokinin (CCK) is described. In fasted C57BL/6 mice, the anorexigenic effect of CART was enhanced by a subthreshold dose of CCK, while CCK1 receptor antagonist devazepide blocked the effect of CART peptide on food intake. In the third part of the thesis, food intake in fed lean and MSG (monosodium- glutamate treated) obese male mice with lesions in nucleus arcuatus (ARC) showed that anorexigenic action of CART peptide was preserved but satiety effect of CCK was completely lost and therefore, effective leptin signaling in ARC is necessary for satiety effect of CCK. Finally, the PrRP receptor was detected in...