Změny v expresi genů B buněčné linie Ramos RA-1 po infekci Francisella tularensis

Abstract

Francisella tularensis je fakultativně intracelulární bakterie způsobující onemocnění tularemii různých druhů savců včetně člověka. Je schopná infikovat fagocytující i nefagocytující buňky. V naší práci jsme se zaměřili na studium B buněk, jejichž úloha v infekci F. tularensis byla dlouhou dobu opomíjena. Za posledních 10 let však byly publikovány práce, které poukazují na zapojení B buněk v časné imunitě proti F. tularensis. Cílem této diplomové práce bylo zjistit, jak se mění exprese genů kódujících molekuly cytokinů u B buněk vlivem infekce F. tularensis a vlivem stimulace bakteriálním rekombinantním proteinem IglC a lipopolysacharidem. Tyto změny jsme zkoumali na B buněčné linii Ramos RA-1. Metodou reverzní transkriptázové polymerázové řetězové reakce jsme detekovali geny pro cytokiny IFN-γ, IL-10 a TGF-β. Klíčová slova: Francisella tularensis, B buňky, cytokiny, reverzní transkriptázová polymerázová řetězová reakce

Francisella tularensis is a facultative intracellular bacterium causing disease tularemia of different species of mammals, including humans. It is able to infect phagocytotic as well as non-phagocytotic cells. We focused on the study of B cells, that role in the infection of F. tularensis have been, until recently, regarded as not significant. Over the last 10 years several studies showed important role of B cells in innate immunity to F.tularensis infection. The aim of this thesis was to idenify changes in the expression of genes that encode molecules of cytokines produced by B cells, after F. tularensis infection, due to stimulation with bacterial recombinant protein IglC and lipopolysaccharide. These changes were examinated on B cell line Ramos RA-1. Using reverse transcriptase polymerase chain reaction, we detected these cytokines: IFN-γ, IL-10 a TGF-β. Key words: Francisella tularensis, B cells, cytokines, reverse transcriptase polymerase chain reaction