Stanovení vybraných nečistot v kvartérních amoniových sloučeninách s potenciálním antibakteriálním účinkem metodou kapilární zónové elektroforézy

Abstract

V této práci je popsán vývoj metody, která byla použita pro separaci a stanovení nečistot pyridinu a isochinolinu v kvartérních amoniových sloučeninách pomocí kapilární zónové elektroforézy. Analýza probíhala v křemenné kapiláře při napětí 20 kV a teplotě 25 řC. UV detekce probíhala p ři 210 nm a 254 nm. Celková délka kapiláry o vnitřním průměru 75 µm činila 58 cm a její efektivní délka byla 49,5 cm. Vzorky byly nastřikovány po dobu 6 s tlakem 50 mbar. Celá analýza trvala méně než 5 minut. Jako optimální základní elektrolyt byl vybrán 70 mM acetát s 5% (v/v) methanolu. Jeho pH bylo upraveno na hodnotu 4,7 pomocí hydroxidu sodného. Jako vnitřní standard byl použit imidazol. Kalibrační závislosti byly lineární jak pro pyridin (0,1 - 10,4 µg/ml; r2 = 0,9988), tak pro isochinolin (0,1 - 9,98 µg/ml; r2 = 0,9972). Limit detekce byl stanoven 0,06 µg/ml pro pyridin a 0,02 µg/ml pro isochinolin. Optimalizovaná metoda byla použita ke stanovení obsahu pyridinu a isochinolinu jako nečistot ve vzorcích kvartérních amoniových sloučenin.

In this study, capillary zone electrophoresis with UV detection was developed for separation and determination of impurities pyridine and isoquinoline in quaternary ammonium compounds. The analysis was performed in a fused silica capillary at 20 kV and 25 řC with UV detection at 210 nm and 254 nm. The total length of the capillary was 58 cm, the effective length was 49,5 cm and its inner diameter was 75 µm. The injection was carried out for 6 seconds and under pressure of 50 mbar. The analysis took less than 5 minutes. The optimal background electrolyte consisted of 70 mM acetic acid with 5% (v/v) of methanol. pH was adjusted to 4,7 with sodium hydroxide. As internal standard was chosen imidazole. The calibration graphs were linear for both pyridine (0,1 - 10,4 µg/ml; r2 = 0,9988) and isoquinoline (0,1 - 9,98 µg/ml; r2 = 0,9972). The limits of detection were 0,06 µg/ml for pyridine and 0,02 µg/ml for isoquinoline. The optimized method has been used to determine the content of pyridine and isoquinoline as impurities in samples of quaternary ammonium compounds.