Využití kroužkovce Tubifex tubifex Müll. jako modelu pro testování biologické aktivity

Abstract

Záměrem předložené disertační práce bylo využití kroužkovce Tubifex tubifex jako modelu pro testování biologické aktivity. Nítěnka byla v této studii použita pro hodnocení fotosenzibilizace, tj. zcitlivění organismu vůči UVA záření (365 nm; hustota zářivého toku 350 μW/cm2) po styku s určitými látkami. Testované látky zahrnovaly jednak prokázané fotosenzibilizátory: bengálskou červeň khelin a xantotoxin. Dále přírodní izolované látky - thiofenový polyyn, umbelliferon, skopolin, skopoletin. Zástupce syntetických látek - salicylanilidy a thiosalicylanilidy a léčiva penicilinového typu Augmentin, Ospamox a jejich standard účinné látky amoxicilin. Závěrečné zhodnocení fotosenzibilizačních vlastností látek bylo provedeno dle Směrnice komise 2000/33/ES pro FOTOTOXICITY - ZKOUŠKY FOTOTOXICITY 3T3 NRU IN VITRO. Test probíhal ve 24jamkových destičkách. Kdy jedna sada destiček s fotosenzibilizátorem byla ozařována a druhá sada byla po celou dobu experimentu umístěna v termostatu (20±2řC) bez přítomnosti světla jako temnostní kontrola. Vyhodnocení probíhalo ihned po zvolené době ozařování (15, 30, 45, 60, 120, 240 min). Jako endpointy byla navržena mortalita a procento poškozených jedinců. Mezi prokázanými fotosenzibilizátory byl dosažen nejvyšší PIF faktor (5,72) u bengálské červeně po 30 min ozařování a při...

The aim of the presented doctoral thesis was to use the sludge worm Tubifex tubifex as a model for biological activity testing. In the presented study, the Tubifex worm was used to evaluate photosensibilisation, i.e. sensibilisation of an organism towards UVA radiation (365 nm; radiant flux density of 350 μW/cm2) after contact with certain substances. The tested substances included proven photosensibilizing agents - rose bengal, khellin and xanthotoxin; isolated natural substances - thiophene polyacetylene umbelliferon, scopoline, and scopoletine; synthetic compounds - salicylanilides and thiosalicylanilides; and penicillin drugs Augmentin and Ospamox and their active substance standard amoxicillin. The final evaluation of photosensibilizing properties of the substances was carried out according to the Commission Directive 2000/33/EC PHOTOTOXICITY - IN VITRO 3T3 NRU PHOTOTOXICITY TEST. The test was performed in 24-well plates where one set of plates with the photosensibilizing agent was irradiated and the second set was placed in an incubator (20±2řC) as a dark control without any light presence for the whole period of the experiment. The plates were evaluated immediately after the given period of irradiation (15, 30, 45, 60, 120, and 240 minutes). Mortality and percentual number of damaged individuals were...