Evaluation of biological activity of resveratrol and its derivatives in cell cultures

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Universita Roma TRE Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologie Katedra biochemických věd Kandidát: Jaroslav Miler Školitelé: Prof. Sandra Incerpi Mgr. Eva Novotná, Ph.D. Název diplomové práce: Hodnocení biologické aktivity resveratrolu a jeho derivátů na buněčných kulturách Záměrem práce bylo zkoumat především antioxidační a částečně i cytostatické vlastnosti resveratrolu, jeho čtyř derivátů (trimethoxyresveratrolu, pterostilbenu, oxyresveratrolu a AVD 163 - molekuly lišící se od trimethoxyresveratrolu polohou jedné methoxy skupiny) a 2,2',5-trihydroxychalkonu. Pokusy byly prováděny na dvou odlišných buněčných kulturách (L6 myoblastech získaných z kosterního svalstva krys a lidských THP-1 monocytech z periferní krve pacientů s akutní monocytickou leukémií). Byly použity čtyři metody: Fluorimetrické stanovení ROS pomocí DCF-DA (dichlorfluoresceindiacetátu); MTT test pro hodnocení cytotoxicity (provedeno pouze s L6 myoblasty); počítání množství buněk k hodnocení antiproliferační či proliferační aktivity moleku; EPR spektroskopie (elektronová paramagnetická rezonance) byla provedena jen s nejnadějšími molekulami. Hlavní metodou bylo fluorimetrické stanovení míry inhibice produkce ROS. Nejlepší výsledky prokazoval 2,2',5-trihydroxychalkon. Oxyresveratrol také...

Charles University in Prague University Roma TRE Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biology Department of Biochemical Sciences Candidate: Jaroslav Miler Supervisors: Prof. Sandra Incerpi Mgr. Eva Novotná, Ph.D. Title of diploma thesis: Evaluation of biological activity of resveratrol and its Derivatives in cell cultures The aim of this thesis was to research especially antioxidative and partly cytostatic features of resveratrol, its four derivatives (trimethoxy-resveratrol, pterostilbene, oxyresveratrol and AVD 163 - compound which has different position of one methoxy group than trimethoxy-resveratrol) and 2,2',5'-trihydroxychalcone. Experiments were carried out with two different cell cultures (L6 myoblasts from skelatal muscles of rats and human THP-1 monocytes from peripheral blood of patients with acute monocytic leukaemia). Four varied methods were used - fluorimetric ROS determination with DCF-DA (dichlorofluorescein diacetate) as a probe; MTT assay for evaluation of the cytotoxicity (just with L6 myoblasts); cell counting to evaluate the (anti)proliferative activity; electron paramagnetic resonance spectroscopy (EPR) was carried out only with the most promising compounds (2,2',5'-trihydroxychalcone, resveratrol, oxyresveratrol and pterostilbene. Main method was ROS...