Determination of Selected Active Substance in the Preparation IX

Abstract

Cíl. Cílem této práce bylo vyvinout novou metodu pro stanovení obsahu nečistot v Bromhexinu hydrochloridu (BHX HCl) účinné látce (API) pomocí UPLC se záměrem zkrátit čas analýzy a snížit velký objem mobilní fáze při zachování spolehlivé chromatografické účinnosti. Kromě toho nově vyvinutá metoda měla být validována, aby byla zajištěna její spolehlivost. Metody. Pro optimalizaci chromatografických podmínek byly použity dva přístupy: 1. optimalizace teploty kolony 25-40 ř C) při průtoku 0,35 ml / min, 2. optimalizace různých průtoků (od 0.35-0.6 ml / min) při teplotě kolony 40 ř C. Objem nástřiku byl v obou případech 1,6 μL. Optimalizace chromatografických podmínek byla založena na hodnocení rozlišení mezi BHX HCl a nečistoty C, faktoru symetrie a tlaku na koloně. Parametry používané k validaci metody byly: linearita, přesnost, správnost, selektivita metody a limity kvantifikace a detekce. Výsledky. Optimální kombinace chromatografických podmínek byla: průtok 0,5 ml / min při teplotě kolony 40 ř C. V průběhu validace metody parametr linearity vykázal vysokou korelaci mezi plochami píků a odpovídajícími koncentracemi (R2 = 0,998). Detekční limit byl 0,006 % a kvantitativní limit 0,02 %. Výsledná relativní směrodatná odchylka (RSD%) ze šesti analýz obsahu nečistot v rámci testování přesnosti byla v...

Aim. The purpose of this work was to develop a new method for determination of impurity content in Bromhexine Hydrochloride (BHX HCl) active pharmaceutical ingredient (API) using an Ultra High-Performance Liquid Chromatography (UPLC), in favor of shortening the analysis time and sparing the usage of large volumes of mobile phase while preserving a reliable chromatographic performance. In addition, the newly developed method had to be validated to ensure its suitability of use. Methods. Two approaches were used to optimize the chromatographic conditions: 1.Adaption of different column temperatures (from 25-40řC) at flow rate 0.35 mL/min; 2.Adaption of different flow rates (from 0.35-0.6 mL/min) at 40řC column temperature. Injection volume was the same in both cases-1.6μL. Optimization of chromatographic conditions was based on the resolution between BHX HCl and Impurity C, the peak symmetry and column backpressure limit. The tests employed to validate the method were: linearity, limit of detection, limit of quantification, precision, accuracy and selectivity of analytical procedure. Results. The most optimal combination of chromatographic conditions was a flow rate of 0.5 mL/min at column temperature of 40řC. During method validation, linearity test showed a high correlation factor (R2 =0.998)...