Sledování exprese endoglinu u normocholesterolemických a hypercholesterolemických myší.

Abstract

Petr Fiala Sledování exprese endoglinu u normocholesterolemických a hypercholesterolemických myší Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Cíl práce: Sledovali jsme změny exprese endoglinu u normocholesterolemických a hypercholesterolemických myší. Změny exprese byly pozorovány v aortě myší za pomocí imunohistochemických metod. Kvantifikace změn exprese byla provedena pomocí Western blot analýzy. Metody: Pro pokus bylo použito 8 samic normocholesterolemických myší kmene C57BL/6J a 8 samic Apo-E receptor deficientních myší kmene C57BL/6J. Myši z apoE-deficientní skupiny byly krmeny 8 týdnů standardní dietou s obsahem 1% cholesterolu. Dále byla provedena biochemická analýza krev. Pro imunohistochemickou analýzu byly nakrájeny řezy obsahující semilunární chlopně s aortou. Následně byly pořízeny příčné řezy a umístěny na podložní sklíčko potažené vrstvou želatiny. Pro detekci exprese endoglinu byla použita metodika Avidin-Biotin (ABC) s detekčním činidlem diaminobenzidinem (DAB). Výsledky: Exprese endoglinu byla viditelná pouze na cévním endotelu u normocholesterolemických myší. U Apo-E deficientních myší byla exprese endoglinu detekována na cévním endotelu aterosklerotické léze, endotelu aortálních chlopní a dále v oblastech mimo léze a v kapilárách...

Petr Fiala The study of endoglin expression in normocholesterolemic and hypercholesterolemic mice Diploma thesis Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Pharmacy Background: We studied the changes of expression of endoglin in normocholesterolemic and hypercholesterolemic mice. The changes of endoglin expression were detected in aorta by means of imunohistochemical methods and followed by quantification by Western blot analysis. Methods: We used 8 female normocholesterolemic mice C57BL/6J and 8 female ApoE deficient mice C57BL/6J. ApoE deficient mice were fed during a 8 weeks by chow diet with 1% of cholesterol. Biochemical analysis of blood samples was performed. Then we prepared cuts of aorta with segment of semilunar valve for immunohistochemical analysis. Detection of expression of the endoglin was performed by Avidin- Biotin method (ABC) with detection by DAB. Results: The expression of endoglin was detected only on endothelium of normocholesterolemic mice. The expression of endoglin in apo-E deficent mice was detected on endothelium of atherosclerosis plaque, aortic semilunar valves and also in endothelium with no qtherosclerosis and in capillaries in myocardium. The stronger expression of endoglin was visible in Apo-E deficient mice when compared with...