Vývoj UHPLC-MS/MS metody pro stanovení pravastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Alena Mikšová Školitel: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, PhD. Název diplomové práce: Vývoj UHPLC-MS/MS metody pro stanovení pravastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů Tato diplomová práce se zabývá vývojem UHPLC-MS/MS metody určené pro stanovení pravastatinu, rosuvastatinu a jejich metabolitů. Byly optimalizovány základní parametry pro MS detekci - desolvační teplota, iontová optika (napětí na hexapolu a na extraktoru), průtok dusíku na vstupním kuželu, napětí na kapiláře, průtok dusíku a napětí na vstupním kuželu, které je specifické pro každou látku. K separaci analytů byla použita kolona BEH C18 (2,1 x 100 mm, 1,7µm). Jako detektor byl použit trojitý kvadrupól. Ionizace byla provedena elektrosprejem v negativním i pozitivním modu. Kvantifikace analytů byla provedena pomocí SRM (monitorování vybrané reakce). Prekurzorovým iontem pro všechny stanovované statiny v pozitivním modu byl vybrán iont [M+H]+ , který byl v hmotnostním spektru nejintenzivnější. U pravastatinu laktonu byl dále vybrán amonný adukt [M+NH4]+ . V negativním modu byl u všech stanovovaných statinů vybrán iont [M-H]- . U pravastatinu laktonu a rosuvastatinu laktonu byl rovněž vybrán acetátový adukt [M-H+CH3COO]- . Při zvolených...

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Alena Mikšová Supervisor: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, PhD. Title of Graduation Thesis: A development of UHPLC-MS/MS method for the determination of pravastatin, rosuvastatin and their metabolites This graduation thesis is dealing with the development of UHPLC/MS-MS method for the determination of pravastatin, rosuvastatin and their metabolites. The basic parameters were optimized for MS detection - desolvation temperature, ion optics (RF lens and extractor), nitrogen flow at the sample cone, capillary voltage, nitrogen flow and cone voltage, which is specific for each substance. Separation of analytes was performed on BEH C18 analytical column (2.1 x 100 mm, 1.7µm). Triple quadrupole was used for detection. Electrospray ionization was performed in both negative and positive mode. Quantification of analytes was performed using the SRM (selected reaction monitoring). Ion [M+H]+ was chosen for all statins determined in positive ion mode. This ion was the most intense in full scan spectrum. In positive ion mode pravastatin lactone offered also ammonium adduct [M+NH4]+ . All statins determined in negative mode provided a precursor ion [M-H]- . Pravastatin lactone and rosuvastatin lactone...