Cyclophosphamide-induced cystitis in rats. An experimental study of the importance of muscarinic, nitrergic and purinergic mechanisms.

Abstract

Tato práce je zaměřena na významnost cholinergních, purinergních a nitrergních mechanismů ve zdravém a zaníceném močovém měchýři potkana, a mj. jakým způsobem ovlivňuje konkrétní předléčení stav zánětu. Experimenty byly provedeny na předem připravených stripech ze zdravých potkanů a potkanů , u kterých byl vyvolán zánět močového měchýře cyklofosfamidem. In vitro funkční studie zaměřené na kontraktilní odpověď stripů na metacholin a adenosintrifosfát byly zkoumány u kontrolní skupiny a dále v přítomnosti pěti různých antagonistů a inhibitorů. Potkani byli předléčeni pomocí látek 4-DAMP (2 mg/kg), tj. antagonista M3, M5 muskarinních receptorů; DPCPX (1 mg/kg) jakožto antagonista P1A1 receptoru; PSB1115 (1 mg/kg) působící jako antagonista P1A2B receptoru; L-NAME (60 mg/kg) jako inhibitor endoteliální NO syntázy a nakonec pomocí suraminu (10 mg/kg), který působí jako neselektivní antagonista P2 purinergních receptorů. Výsledné změny byly pozorovány pomocí funkčních a morfologických studií. Nejlepší výsledky ukázaly skupiny předléčené látkami DPCPX a L-NAME. Ukázalo se, že předléčení pomocí DPCPX a L- NAME normalizovalo kontraktilní odpověď na metacholin a ATP v zanícených močových měchýřích a pomohlo redukovat zánětlivé projevy. Z těchto zjištění vyplývá, že P1A1 purinergní receptory a oxid dusnatý...

The present thesis is focused on studies of the importance of cholinergic, purinergic and nitrergic mechanisms in the healthy and inflamed rat urinary bladder, furthermore in which way specific pre-treatment affects the state of inflammation. Experiments were performed on prepared strips from normal healthy rats and cyclophosphamide-induced cystitis rats. In vitro contractile response of the strips to MeCh and ATP were investigated in the saline/CYP control group as well in the presence of five various antagonists and inhibitors. The rats were pre-treated by 4-DAMP (2mg/kg) as a M3, M5 muscarinic receptor antagonist; DPCPX (1mg/kg) as a P1A₁ purinoceptor antagonist; PSB1115 (1mg/kg) as a P1A2B purinoceptor antagonist; L-NAME (60mg/kg) as an inhibitor of eNOS and finally by suramin (10mg/kg) as a non-selective P2 purinergic receptor antagonist. Altered effects were observed via functional and morphological studies. The best results showed DPCPX and L-NAME pre- treated groups. It was found that DPCPX and L-NAME pre-treatments normalized contractile response to MeCh and ATP of the inflamed bladders and helped to reduce inflammatory signs. These in vitro functional findings evoke that P1A1 receptor and nitric oxide are important pro-inflammatory factors since their inhibitions refine the state of...