Identifikace fenolických látek v rostlinných extraktech s využitím UHPLC-MS/MS

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Ivana Kmeťová Školiteľ: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Názov diplomovej práce: Identifikace fenolických látek v rostlinných extraktech s využitím UHPLC-MS/MS Cieľom tejto diplomovej práce bola identifikácia fenolických látok v suchom lyofilizovanom vodnom extrakte z listov jahody obyčajnej (Fragaria Vesca L.) s použitím ultra- vysoko účinnej kvapalinovej chromatografie spojenej s elektrosprejovou tandemovou hmotnostnou spektrometriou (UHPLC-ESI-MS/MS), ktorá poskytuje výhody pri identifikácii komplexných rastlinných vzoriek. Fenolické zlúčeniny reprezentujú skupinu vysoko komplexných prirodzene sa vyskytujúcich molekúl v rastlinách, ktoré majú širokú škálu biologických a fyziologických funkcií a slúžia ako chemotaxonomické markerove zlúčeniny. Táto práca bola zameraná na flavonoidy a im príbuzné látky. Pre separáciu bola použitá UHPLC miesto bežnejšej HPLC pre svoju oveľa vyššiu separačnú účinnosť, ktorá je kľúčová pri úspešnej separácii komplexných vzoriek. Navyše, UHPLC umožnila skrátiť dobu analýzy. Určenie štruktúry fenolických zlúčenín bolo založené na vyhodnotení a porovnaní MS a MS/MS spektier v pozitívnom i v negatívnom iónovom režime ESI. Využité boli základné skeny, skeny...

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical chemistry Candidate: Ivana Kmeťová Supervisor: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Title of Diploma thesis: Identification of phenolic compounds in plant extracts using UHPLC-MS/MS The aim of this Diploma thesis was identification of phenolic compounds in dry lyophilized water extract of leaves of wild strawberry (Fragaria vesca L.) using ultra-high performance liquid chromatography coupled with electrospray tandem mass spectrometry (UHPLC-ESI-MS/MS), advantageous in identification of complex plant samples. Phenolic compounds represent a group of very complex naturally occurring molecules in plants, possessing a wide variety of biological and physiological functions and acting as chemotaxonomic marker substances. This work was focused on flavonoids and related substances. For separation, UHPLC was used instead of more common HPLC due to its much higher separation efficiency that is crucial for successful separation of complex samples. Moreover, UHPLC enabled reduction of analysis time. Determination of structures of phenolics was based on evaluation and comparison of MS and MS/MS spectra in both negative and positive ESI ion modes. Full scan spectra, product ion spectra, neutral loss scans and reconstructed...