Vývoj UHPLC-MS/MS metody pro stanovení skupiny statinů a jejich metabolitů

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Pavel Svoboda Školitel: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Vývoj UHPLC-MS/MS metody pro stanovení skupiny statinů a jejich metabolitů Tato diplomová práce se zabývá vývojem metody pro stanovení skupiny statinů a jejich metabolitů pomocí ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s tandemovým hmotnostním spektrometrem typu trojitého kvadrupólu. V rámci diplomové práce byly optimalizovány chromatografické podmínky a parametry hmotnostního spektrometru. Na závěr byla hodnocena citlivost, linearita a opakovatelnost metody. Pro separaci byla zvolena kolona BEH C18 (50 x 2,1 mm; 1,7 µm). Výběr kolony byl proveden při použití UV spektrofotometrického detektoru. Mobilní fáze pro gradientovou eluci byla tvořena 0,1 mM octanem amonným o pH = 4 a acetonitrilem v počátečním poměru 70:30. Optimalizace parametrů hmotnostního spektrometru byla započata výběrem prekurzorových iontů po přímé infuzi standardů. Následně byly podrobeny optimalizaci parametry iontového zdroje. Po výběru produktových iontů byly optimalizovány iontové přechody. Optimalizace iontových přechodů byla doplněna hodnocením vlivu aditiv na ionizaci. Všechny zmíněné kroky byly hodnoceny jak v pozitivním, tak...

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Pavel Svoboda Supervisor: Doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Title of Graduation Thesis: Development of UHPLC-MS/MS method for the determination of statins and their metabolites This graduation thesis deals with development of the method for the determination of statins and their metabolites by ultra-high performance liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry. First, the chromatographic conditions were optimized. Next, the parameters of mass spectrometer were optimized. And finally, repeatability, linearity and sensitivity of the method were assessed. Chromatographic column BEH C18 (50 x 2.1 mm, 1.7 µm) was used for the analysis. The choice of column was performed using UV spectrophotometric detector. The mobile phase of the gradient elution consisted of 0.1 mM ammonium acetate (A) and acetonitrile (B). The initial ratio of mobile phase A:B was set at 70:30. The optimization of the mass spectrometry parameters started with the selection of precursor ions using direct infusion. Thereafter, the ion source parameters of the mass spectrometer were optimized. The ion transitions were optimized after the selection of product ions. The optimization of ion transitions was...