Inhibiční účinek anthokyanidinů na jaterní karbonylreduktasu

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Jitka Hlaváčová Školitel: Prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Inhibiční účinek anthokyanidinů na jaterní karbonylreduktasu Karbonylreduktasa (CBR) je redukční enzym, jenž hraje významnou roli v první fázi biotransformace endogenních i exogenních substrátů. Podílí se na detoxikaci mnoha xenobiotik, mezi nimi i důležitých léčiv. Rozdíly v expresi a aktivitě jaterních biotransformačních enzymů mohou ovlivnit efektivitu a bezpečnost léčby. Cílem této práce bylo porovnat aktivitu a expresi CBR u starých a mladých jedinců, stanovit inhibiční vliv vybraných anthokyanidinů na aktivitu CBR u lidí a potkanů a pro nejsilnější inhibitory určit hodnotu IC50 a typ inhibice. U starých potkanů byla zjištěna významně vyšší aktivita CBR než u mladých potkanů a také se u nich projevila větší interindividuální variabilita. Při měření aktivity CBR u lidských vzorků nebyly zjištěny signifikantní rozdíly v souvislosti s věkem. Anthokyanidiny vykazovaly mírný až středně silný inhibiční vliv na CBR. U lidí byl enzym nejsilněji inhibován delfinidinem (IC50 = 16 µM) a u potkanů pelargonidinem (IC50 = 23 µM). Delfinidin působil jako nekompetitivní inhibitor CBR, zatímco u pelargonidinu byl zjištěn smíšený...

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Jitka Hlaváčová Supervisor: Prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Title of diploma thesis: Inhibitory effect of anthocyanidins on hepatic carbonyl reductase Carbonyl reductase (CBR) is a reducing enzyme that plays a significant role in the first phase of biotransformation of both endogenous and exogenous substrates. It participates in detoxification of many xenobiotics, among them important drugs. Differences in expression and activity of hepatic biotransforming enzymes may affect efficiency and safety of treatment. The aim of this work was to compare the activity and expression of CBR in old and young individuals and to define an inhibitory effect of selected anthocyanidins on the activity of CBR in humans and rats and to determine a value of IC50 and a type of inhibition for the strongest inhibitors. Meaningly higher activity of CBR was detected in the senescent rats compared to the young ones and the old rats also showed larger interindividual variability. No significant age- related differences have been identified by measurement of activity CBR in human samples. Anthocyanidins showed a mild to moderate inhibitory effect on CBR. The enzyme was most strongly inhibited by delphinidin (IC50...