Mechanismy průniku sylicylátů monovrstvami buněk Caco-2: zapojení transportních proteinů.

Abstract

The aim of this work is to study properties of the transport of salicylic acid and its derivates across Caco-2 cell monolayers, an influence of possible inhibitors of cell transportation and a brief review of related issues. The influence of substance, which opens tight junctions between Caco-2 cells, so called absorption enhancers, is also examined. The main goal is to find out, what kind of transport takes the main part in salicylic acid transport and to compare the results to the data obtained using gentisic and 5-hydroxyisophthalic acid, and, at the same time, to study the influence of ethylenediaminetetraacetic acid as an absorption enhancer and to compare possible inhibitive effect of several compounds. It was assumed that both passive and active transport take part in the transport of salicylic acid. The theoretical part of the thesis briefly summarizes chemical substances properties, which have an influence on their transport across cell membranes, introduces Caco-2 cells as an important instrument of drug absorption and distribution research, defines the individual types of cell transports and describes the types of transporter proteins which can be localized on the Caco-2 cell membrane. The experimental part of the work describes the technique of Caco-2 cells cultivation and the process of...

Souhrn Práce se zabývá transportem kyseliny salicylové a jejích derivátu pres Caco-2 bunecné kultury a vlivem možných inhibitoru bunecného transportu. Dále se zabývá vlivem látek rozvolnujících tesné spoje (tight junctions) mezi Caco-2 bunkami. Hlavním cílem bylo zjistit typ transportu, jakým je kyselina salicylová prenášena, výsledky porovnat s transportem kyseliny gentisové a 5-hydroxyisoftalové, posoudit vliv ethylendiamintetraoctové kyseliny na prunik kyseliny salicylové a porovnat možný inhibicní úcinek _-kyano-4-hydroxyskoricové kyseliny, probenecidu, pravastatinu, kyseliny benzoové a 2-hydroxy-3-isopropylbenzoové. Predpokládal jsem, že na transportu kyseliny salicylové se podílí i pasivní difúze i transportní proteiny. Teoretická cást práce strucne shrnuje vlastnosti chemických látek, které mají vliv na transport pres bunecné membrány a predstavuje Caco-2 bunky jako prostredek výzkumu vstrebávání a distribuce léciv v lidském organismu. Definuje jednotlivé typy transportu pres bunecné membrány, popisuje typy transportních proteinu, které se nacházejí na membránách bunek lidského adenokarcinomu a podává strucný prehled souvisejících témat. Experimentální cást práce popisuje techniku kultivace Caco-2 bunek a metodiku transportních experimentu. Vetšina experimentu byla provádena pri teplote 37řC s pH...