Analytické a bioanalytické hodnocení potenciálních léčiv odvozených od aroylhydrazonu

Abstract

High-performance liquid chromatography (HPLC) is a progressive analytical method used for qualitative and quantitative drug analysis. This work describes various modifications of the chromatographic method for determining of BSIH (isonicotinic acid [2-(4,4,5,5-tetramethyl-[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)- benzylidene]-hydrazide) and SIH (salicylaldehyde isonicotinoyl hydrazone) in rabbit plasma. BSIH belongs to prochelators which convert to iron chelator SIH in the presence of hydrogen peroxide. Increased stability in plasma and lower toxicity even during repetitive administration is the advantage of BSIH. Separation of BSIH, SIH and internal standard (o-108) was tested on various stationary phases using different chromatographic conditions. However, none of them provided better results than the initial one. Tha analysis was performed on chromatographic column Zorbax Bonus-RP (150 mm x 3,0 mm, particle size 3,5 µm,) with guard column using identical sorbent at a flow rate of 0,3 ml/min. Phosphate buffer (10 mM monosodium phosphate, pH6, adjusted with sodium hydroxide) : acetonitrile with methanol (60:40) (v/v) with the ratio of 60:40 (v/v)) as the mobile phase. Detector response was registered at 297 nm. Linearity of the method was verified in the concentration range of 10 µM to 100 µM for both BSIH and...

Vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC) patří mezi progresivní analytické metody používané pro kvalitativní i kvantitativní analýzu léčiv. Tato práce popisuje různé možnosti upravení chromatografické metody pro stanovení BSIH ([2-(4,4,5,5-tetramethyl-[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)-benzyliden]-hydrazid kyseliny isonikotinové) a SIH(salicylaldehyd isonikotinoyl hydrazon) v králičí plazmě. BSIH se řadí mezi prochelátory, které se selektivně aktivují v přítomnosti peroxidu vodíku na chelátor železa SIH. Výhodou BSIH je vyšší stabilita v plazmě a nízká toxicita i při opakovaném podání. Separace BSIH, SIH a vnitřního standardu (o-108) byla zkoušena na několika kolonách za různých chromatografických podmínek. Žádná z vyzkoušených modifikací však nebyla vhodnější než ta, ze které se vycházelo. Analýza probíhala na chromatografické koloně Zorbax Bonus-RP (150 mm x 3,0 mm, částice 3,5 µm,) s předkolonou se stejným sorbentem; průtok 0,3 ml/min. Jako mobilní fáze sloužil fosfátový pufr (10mM dihydrogenfosforečnan sodný, pH6, upraveno hydroxidem sodným) : acetonitril s methanolem (60:40) (v/v) v poměru 60:40 (v/v). Odezva detektoru byla zaznamenána při vlnové délce 297 nm. Byla ověřena linearita metody v rozmezí koncentrací od 10 µM do 100 µM pro BSIH a SIH. Stabilita BSIH a SIH v králičí plazmě byla sledována...