Vliv alfa-humulenu na adhezi prsní nádorové linie MDA-MB-231

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Markéta Marešová Školitel: Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv alfa-humulenu na adhezi prsní nádorové linie MDA-MB-231 Seskviterpen α-humulen je obsažený v silici voskovníku červeného (Myrica rubra), která má řadu biologických účinku. Cíl této práce byl zaměřen na buněčnou adhezivitu nádorových buněk. Sledovaly se účinky α-humulenu na expresi vybraných adhezních molekul buněčné linie prsního nádoru MDA-MB- 231. Zároveň byl ověřen cytotoxický efekt α-humulenu na tuto linii. Působení α-humulenu na proliferaci buněk bylo hodnoceno s použitím neutrální červeně (NRU test) a ověřeno systémem xCelligence. Adhezivita buněk se sledovala také prostřednictvím systému xCelligence. Změny exprese vybraných adhezních molekul působením α-humulenu byly sledovány metodami Western blot a kvantitativní polymerázovou řetězovou reakcí na úrovni proteinů a mRNA. Výsledky prokázaly, že α-humulen výrazně ovlivňuje proliferaci buněk po 24 hodinovém působení (IC50 13,6 µg/ml). Adhezivita buněk byla působením samotného α-humulenu mírně zvýšena. Sledované adhezní molekuly EpCAM a β-katenin ovlivněny působením α-humulenu téměř nebyly, naopak ICAM1 byl na úrovni mRNA po 12 hodinách zvýšen a transkripční...

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Bc. Markéta Marešová Supervisor: Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Title of diploma thesis: Effect of alpha-humulene on adhesion of breast cancer cell line MDA-MB-231 α-humulene is a sesquiterpene contained in the essential oil of Chinese Bayberry (Myrica rubra), which has various biological effects. The aim of this thesis was to study the cell adhesion of tumor cell line MDA-MB-231, and the effects of α-humulene on expression of cell adhesion molecules. Furthermore, the cytotoxic effect of α-humulene on this cell line was verified. Effect of α-humulene on cell proliferation was evaluated by neutral red uptake test (NRU test) and by xCelligence system. Cell adhesion was also continuously monitored by xCelligence. Expression ganges of cell adhesion molecules upon α-humulene treatment were determined by Western blotting and by quantitative polymerase chain reaction on the protein and mRNA levels, respectively. The proliferation of the cells was significantly affected by α-humulene after 24 hour treatment (IC50 13.6 µg/ml). α-humulene alone caused slightly increased cell adhesion. Adhesion molecules EpCAM and β-cathenin were almost unaffected. Level of ICAM1 mRNA was increased after 12 hours and...