Kultury léčivých rostlin in vitro - XVII

Abstract

Ostropestřec mariánský, Silybum marianum L. Gaertn., je zdrojem flavonoidu taxifolinu a flavonolignanů - silymarinového komplexu (silybin, silydianin, silycristin a isosilybin). Pro získávání těchto sekundárních metabolitů je ostropestřec mariánský pěstován na polích. Alternativním způsobem k polní produkci může být pěstování rostlinných kultur in vitro. Oproti intaktní rostlině, však tyto in vitro kultury jeví velmi nízké produkce účinných látek. Jedním ze způsobů, jak produkci sekundárních metabolitů zvýšit, je využití metody elicitace. V této studii byl použit jako elicitor ethephon, v koncentracích 500 µmol/l, 400 µmol/l, 200 µmol/l, 100 µmol/l a 50 µmol/l. Výsledky jeho působení byly porovnávány s působením inhibitoru ethephonu (AgNO3), v koncentraci 120 µmol/l. Analýza vzorků probíhala pomocí HPLC metody. Vzorky byly odebírány po 24, 48, 72, 96 a 168 hodinách působení. U suspenzních kultur byly odebírány rovněž vzorky média, aby se zjistilo, zda dochází k uvolňování látek do živného média. Nejvyšší obsah flavonoidu taxifolinu byl nalezen v médiu suspenzní kultury po 48 hodinách působení ethephonu o koncentraci 400 µmol/l (1,97 mg/100 ml, 197krát více než u kontrolního vzorku). Statisticky významná produkce taxifolinu kalusovou kulturou nastala po 96 hodinách působení ethephonu o koncentraci...

Milk thistle, Silybum marianum L. Gaertn., is a source of flavonoid taxifolin and flavonolignans - silymarin complex (silybin, silydianin, silycristin and isosilybin). Milk thistle is usually obtained by field cultivation. Alternative way for getting the active components, is the use of in vitro cultures. But the production of secondary metabolites by the in vitro cultures is low in comparison with plant. One of the possibilites how to increase this produciton is the method of elicitation. In this study, ethephon as the elicitor, in the concentrations of 500 µmol/l, 400 µmol/l, 200 µmol/l, 100 µmol/l and 50 µmol/l was used with the aim to increase secondary metabolite production in suspension and callus cultures. The effect of ethephon was compared to its inhibitor (AgNO3, 120 µmol/l). The levels of flavonolignans and taxifolin were measured by the method of HPLC. The samples were taken 24, 48, 72, 96 and 168 hours after the ethephon application and inhibitor treatment. The nutrient medium of suspension culture was also tested for the possibity of secondary metabolites releasing into medium. The highest content of flavonoid taxifolin was found in the suspension culture medium after 48 h treatment with ethephon in conc. of 400 µmol/l. The level of taxifolin was increased by 197-fold to 1,97 mg/100...