Porovnání selektivity a retence analytů na dvou HILIC stacionárních fázích

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Nikola Klvanová Školitel: RNDr. Hana Vlčková, Ph.D. Název diplomové práce: Porovnání selektivity a retence na dvou HILIC stacionárních fázích Diplomová práce se zabývá vlivem koncentrace acetonitrilu, pH a koncentrace pufru v mobilní fázi na retenci a selektivitu dvou analytických kolon Luna HILIC (diol) (3 m, 100 x 3,0 mm) a Ascentis ES Cyano (3 m, 100 x 2,1 mm). Pro studii bylo vybráno celkem 28 analytů ze zástupců kyselých, neutrálních a bazických látek. Detekce byla provedena pomocí PDA detektoru při vlnové délce 245 nm. Jako mobilní fáze byla použita směs acetonitrilu a vodné složky (pufr nebo kyselina octová) za izokratické eluce s průtokem mobilní fáze 0,7 ml/min a 0,3 ml/min. Teplota na koloně byla nastavena na 30řC a teplota v autosampleru na 4řC. Nástřik byl 5 l nebo 3 l. Pro snazší hodnocení byly naměřené hodnoty shrnuty v tabulkách a následně sestrojeny grafy. Vliv procentuálního obsahu acetonitrilu v mobilní fázi byl hodnocen na základě grafické závislosti k'= f (%W), ze které je patrná zvyšující se retence se zvyšujícím se obsahem acetonitrilu v mobilní fázi (typické HILIC chování), především v oblasti od 85%) pro všechny analyty na koloně Luna HILIC (diol). Na koloně Ascentis ES...

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Nikola Klvanová Supervisor: RNDr. Hana Vlčková, Ph.D. Title of Diploma thesis: Comparison of selectivity and retention of the analytes on two HILIC stationary phases This diploma thesis deals with an influence of ACN concentration, pH and buffer concentration in mobile phase on the retention of tested analytes and selectivity of two analytical columns Luna HILIC (diol) column (3 μm, 3 mm x 100 mm) and Ascentis ES Cyano column (3 μm, 2.1 mm x 100 mm). A set of 28 analytes including neutral, basic and acidic compounds was chosen for this study. Detection was performed by PDA detector at the wave-length of 245 nm. Measurement was performed isocratically at the mobile phase flow rate of 0.7 ml/min and 0.3 ml/min. Mobile phase was consisted of a mixture of acetonitrile and water component (buffer or acetic acid). The column temperature was set up to 30 řC, autosampler temperature to 4 řC. Injection volume was 5 μl or 3 μl. For easier evaluation of results, measured data are presented in the charts and tables. The influence of the ACN content in mobile phase was evaluated based on the plots of the retention factor that showed increasing retention with increasing ACN content (typical HILIC...