Analýza lipidů v epidermis se sníženou expresí filaggrinu

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra anorganické a organické chemie Michaela Sochorová Školitel: Doc. PharmDr. Kateřina Vávrová, Ph.D. Název diplomové práce: Analýza lipidů v epidermis se sníženou expresí filaggrinu Filaggrin (FLG) je důležitým prvkem správného vývoje pokožky a její funkce jako kožní bariéry. Mutace genu pro FLG a ztráta jeho funkce jsou spojeny s onemocněními jako ichtyosis vulgaris nebo atopický ekzém. Cílem práce bylo zjistit dopad nepřítomnosti FLG na lipidovou matrix stratum corneum (SC). K analýze jsme používali in vitro připravované modely kůže se sníženou (FLG-) i normální expresí FLG (FLG+). Tyto modely nám umožnily sledovat izolovaně vliv FLG na složení a uspořádání lipidů ve SC. FLG je protein, který je ve SC degradován na metabolity, které způsobují acidifikaci SC. Určité pH je důležité pro správnou aktivitu enzymů, které katalyzují vznik ceramidů z jejich prekurzorů. Předpokládali jsme proto snížení obsahu ceramidů v kožní bariéře, kde je redukována hladina FLG. Náš předpoklad byl podložen nálezy u pacientů s atopickou dermatitidou. Nicméně HPTLC analýza ukázala, že množství lipidů je podobné v obou typech modelů. Jediným statisticky významným rozdílem mezi modely byl téměř dvojnásobný obsah mastných kyselin ve SC s FLG-. Na...

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Inorganic and Organic Chemistry Michaela Sochorová Supervisor: Doc. PharmDr. Kateřina Vávrová, Ph.D. Title of Diploma thesis: Analysis of lipids in epidermis with filaggrin knock-down Filaggrin (FLG) is crucial for correct development of epidermis and for its function as a skin barrier. Mutation in the FLG gene and loss of its function is associated with diseases such as ichthyosis vulgaris and atopic dermatitis. The aim of the study was to evaluate the impact of FLG knock-down on the composition of intercellular lipids in the stratum corneum (SC). We used in vitro skin constructs with reduced (FLG-) and normal gene expression (FLG+) for the analysis. It enabled us to study separately the influence of FLG on the composition and organization of SC lipids. FLG is a protein which is degraded to metabolites which cause an acidification of SC. pH is important for optimal activity of enzymes which are pivotal for formation of ceramides from their precursors. Therefore we assumed lower ceramide content in skin barrier when FLG is reduced. Our assumption was supported with findings in patients with atopic dermatitis. However our HPTLC analysis showed that the amount of lipids is similar in both FLG- and FLG+ skin construct....