Lokalizace a charakterizace enzymů oxidujících anthelmintika u motolice kopinaté

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Veronika Salfická Školitel: Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Název diplomové práce: Lokalizace a charakterizace enzymů oxidujících anthelmintika u motolice kopinaté Dikroceliosa je celosvětově rozšířené onemocnění způsobené motolicí kopinatou (Dicrocoelium dendriticum). Nepříznivý dopad má především na chov hospodářských zvířat a živočišnou produkci. K terapii jsou hojně využívaná benzimidazolová anthelmintika, především albendazol. Ve srovnání s ostatními parasitosami je pro zajištění úspěšné léčby potřeba podávat tato léčiva opakovaně s postupně se zvyšujícím dávkováním, což může podporovat rozvoj rezistence. Jedním z obranných mechanismů motolice je biotransformace potencionálně toxických látek na neaktivní metabolit. Cílem této práce bylo nalézt a popsat oxidační enzymy, které se podílí na biotransformaci anthelmintika albendazolu u motolice kopinaté. Pro experiment jsme použili subcelulární frakce (mitochondriální, cytosolické a mikrosomální) připravené z motolice kopinaté izolované z jater muflonů (Ovis musimon). V subcelulárních frakcích byla stanovena aktivita peroxidasy, katalasy, superoxiddismutasy, glutathionperoxidasy a thioredoinreduktasy vůči relativně specifickým substrátům....

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Veronika Salfická Supervisor: Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Title of diploma thesis: Localisation and characterisation of enzymes oxidising anthelmintics in lancet fluke Dicrocoeliosis is a worldwide disease caused by lancet fluke (Dicrocoelium dendriticum). It has a negative impact mainly on livestock farming and animal production. Benzimidazole anthelmintics, especially albendazole, are widely used for its treatment. In comparison with other parasitoses, it is necessary to administer these drugs repeatedly with gradually increasing dosage, which may support drug resistance development, to ensure effective treatment. One of the fluke's defense mechanisms is a biotransformation of potentially toxic substances to an inactive metabolite. The aim of this project was to find out and describe oxidative enzymes, which are involved in the anthelmintic albendazole biotransformation in lancet fluke. In this experiment, subcellular fractions (mitochondrial, cytosolic and microsomal) of lancet flukes isolated from the liver of mouflons (Ovis musimon) were prepared. In subcellular fractions, activities of peroxidase, catalase, superoxide dismutase, glutathione peroxidase, and thioredoxin...