Vedlejší degradační produkty hyaluronanu

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Petra Lišková Školitel: Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Externí konzultant: Ing. Tereza Šílová (rozená Ehlová) Název diplomové práce: Vedlejší degradační produkty hyaluronanu ABSTRAKT Předložená diplomová práce se zabývá vedlejšími degradačními produkty hyaluronanu vznikajícími při alkalické hydrolýze. Teoretická rešerše shrnuje základní poznatky o kyselině hyaluronové (HA). První část je věnována historii, struktuře, chemickým a biologickým vlastnostem HA včetně možných způsobů degradace HA. Na závěr je uveden význam a použití HA. Druhá část popisuje instrumentální metody, které se používají k separaci a purifikaci HA nebo jejích fragmentů, a možnosti jejich identifikace. Experimentální část se zabývá alkalickou hydrolýzou (tzv peelingovou reakcí), následnou separací a identifikací vzniklých fragmentů HA. Nejprve bylo nutné optimalizovat podmínky peelingové reakce pro co nejvyšší výtěžky degradačních produktů, poté byl tetramer HA štěpen v 0,1M hydroxidu sodném při laboratorní teplotě. Pro oddělení majoritně vznikajících vysokomolekulárních fragmentů HA byla použita gelová permeační chromatografie a následně byly jednotlivé degradační produkty separovány pomocí HPLC na reverzní fázi C12. Celkem bylo...

Charles Univerzity in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Bc. Petra Lišková Supervisor: Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Consultant: Ing. Tereza Šílová (born Ehlová) Title of diploma thesis: Side degradation products of hyaluronan ABSTRACT The presented diploma thesis deals with the side degradation products of hyaluronan generated during alkaline hydrolysis. Theoretical part includes basic information about hyaluronic acid (HA). The first part deals with the history, structure, chemical and biological properties of HA, including possible ways of degradation of HA. The importance and application of HA are mentioned in the conclusion. The second part describes the instrumental methods, used for separation and purification of HA or HA fragments, and possibilities of identification. Experimental part deals with the alkali hydrolysis (peeling reaction), following separation and identification of the resulting fragments of HA. At first, it was necessary to optimize the reaction conditions of peeling reaction for the highest yields of degradation products. Then tetramer HA was degraded in 0,1M sodium hydroxide at laboratory temperature. Gel permeation chromatography was used for the separation of high molecular weight fragments. The individual degradation...