Kultury léčivých rostlin in vitro - XV

Abstract

Předmětem této práce je hodnocení produkce sekundárních metabolitů v in vitro kulturách Hypericum perforatum L. po ošetření elicitorem. Cílem bylo zjistit, zda kyselina křemičitá jako abiotický elicitor zvyšuje produkci flavonoidů a hypericinu v in vitro kulturách Hypericum perforatum L. Pokus byl proveden na kalusových a suspenzních kulturách Hypericum perforatum L. za použití živného média dle Murashige- Skoog s přídavkem 10 mg. ml-1 naftyloctové kyseliny jako růstového regulátoru. Elicitor byl přidáván ve formě roztoku a o třech různých koncentracích (C1 = 10.4047∙10-3 mol l-1 , C2 = 10.4047∙10-4 mol l-1 , C3 = 10.4047∙10-5 mol l-1 ) a nechal se působit 6, 12, 24, 48, 72 a 168 hodin. Obsah flavonoidů a hypericinu byl stanoven HPLC analýzou. Uvolňování sekundárních metabolitů do živného média bylo také předmětem studia. Zvýšení produkce flavonoidů a hypericinu v kalusových kulturách po elicitaci nebylo pozorováno v žádné koncentraci. Maximální obsah flavonoidů v suspenzní kultuře byl detekován po 72 hodinách elicitace u koncentrace elicitoru c1, kde byl pozorován hyperosid. Nejvyšší produkce hypericinu v suspenzní kultuře byla detekována po 12 hodinách od začátku elicitace v koncentraci c1. Významné zvýšení hypericinu v suspenzní kultuře bylo i po 24 hodinách působní elicitoru o koncentraci c1....

The subject of this study is the evaluation of secondary metabolites production in Hypericum perforatum L. cultures in vitro after elicitor treatment. The aim was to find if orthosilicic acid as abiotic elicitor increases the flavonoid and hypericin production in Hypericum perforatum L. cultures in vitro. Experiment was carried out in callus and suspension cultures of H. perforatum using Murashige - Skoog nutrient medium78 supplemented with 10 mg. ml-1 α-naphtylacetic acid as growth regulator. The elicitor was added in the form of solution in 3 different concentrations (C1 = 10.4047∙10-3 mol l-1 , C2 = 10.4047∙10-4 mol l-1 , C3 = 10.4047∙10-5 mol l-1 ), it was affecting 6, 12, 24, 48, 72 and 168 hours. The content of flavonoids and hypericin was determined by HPLC. Secondary metabolites release into nutrient medium was also a part of this study. The increasing flavonoid and hypericin production in callus cultures after elicitor application at any concentrations was not observed. The maximum flavonoid content (0.04 mg g-1 DW) in suspension culture was detected after 72 h of elicitor treatment in concentration of C1 where the maximum hyperoside production was observed. The maximum hypericin production (0.21 mg g-1 DW) in suspension culture was detected after 12 h of elicitor application in...