Účinek seskviterpenů na biotransformační enzymy v tkáňových řezech

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Tomáš Zárybnický Školitel: Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Název diplomové práce: Účinek seskviterpenů na biotransformační enzymy v tkáňových řezech Seskviterpeny jsou sekundární metabolity, produkované především vyššími rostlinami. Jedná se o strukturně rozmanité látky s velkým spektrem biologické aktivity. Vykazují např. antiflogistický, antibakteriální, antimalarický nebo protinádorový účinek. Cílem této práce bylo zjistit, jaký je vliv vybraných seskviterpenů - α-humulenu (HUM) a β-karyofylenu (BC) na aktivitu vybraných biotransformačních enzymů - NAD(P)H-chinonoxidoreduktasy 1 (NQO1), glutahion-S-transferasy (GST), a sulfotransferasy (SULT). Jako model byly využity ultratenké tkáňové řezy z jater laboratorního potkana (Rattus norvegicus, kmen Wistar). Tloušťka řezů byla přibližně 200-250 µm a průměr 8 mm. Jaterní řezy byly 30 minut preinkubovány a následně 24 hodin inkubovány (v přítomnosti HUM a BC) ve 12 jamkové destičce a v atmosféře pneumoxidu (95% O2/5% CO2). Vzorky řezů i média byly odebírány v okamžiku výměny média po preinkubaci (čas 0 hod.) a dále po 3, 6 a 24 hodinách. Oba seskviterpeny, HUM i BC, byly testovány v koncentracích 25 µg/ml a 50 µg/ml. Řezy ovlivněné HUM vykazovaly po...

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Tomáš Zárybnický Supervisor: Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Title of diploma thesis: Effect of sesquiterpenes on biotransformation enzymes in tissue slices Sesquiterpenes are secondary metabolites, produced mainly by higher plants. They are structurally diverse compounds with a large spectrum of biological activity. They possess antiphlogistic, antibacterial, antimalarial and antitumour activity. The aim of this diploma thesis was to find out how selected sesquiterpenes - α-humulene (HUM) and β-caryophyllene (BC) influence the activity of chosen biotransformation enzymes - NAD(P)H-chinon oxidoreductase 1 (NQO1), glutathione S-transferase (GST) and sulfotransferase (SULT). Precision-cut tissue slices from the rat liver (Rattus norvegicus, tribe Wistar) were chosen as model system. Thickness of the slices was approximately 200-250 µm and diameter 8 mm. Liver slices were preincubated for 30 minutes and then incubated for 24 hours (in presence of HUM and BC) in a 12-well plate in the atmosphere of pneumoxide (95% O2/5% CO2). Samples of liver slices and medium were taken upon replacing the medium after preincubation (time 0 hours) and then after 3, 6 and 24 hours. Both sesquiterpenes, HUM...