Hodnocení biologicky aktivních látek pomocí HPLC V.

Abstract

Hodnocení biologicky aktivních látek pomocí HPLC V. Diplomová práce Denisa Kokošková Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Byla optimalizována metoda stanovení kyseliny salicylové jako hlavního rozkladného produktu kyseliny acetylsalicylové v tabletách Acylpyrinu, Acylcoffinu a Acifeinu. K hodnocení byla použita vysokoúčinná kapalinová chromatografie s elektrochemickou detekcí. Pro analýzu byla využita monolitická kolona Phenomenex 100 x 4,6 mm, Onyx monolitic C8. Optimalizace a ověření již navržených podmínek elektrochemické detekce bylo zaměřeno na nalezení vhodného složení mobilní fáze a rozpouštědla vzorku. Jako vhodná mobilní fáze byl použit 50 mM roztok fosfátového pufru o pH 2,5 a acetonitrilu v poměru 80 : 20. Průtok kolonou byl 1 ml/min, teplota 25 řC, injikovaný objem 10 μl. Elektrický potenciál byl nastaven na hodnoty E1= 300 mV, E2= 850 mV. Rozsah byl 1 μA. Optimalizovaná metoda byla validována, parametry validace byly přesnost, správnost, linearita, selektivita, robustnost, kvantitativní a detekční limit. Byla sledována stabilita vzorku tablet Acylpyrinu po dobu 48 hodin.

Determination of the Biologically Active Substances using High Liquid Chromatography V. Thesis Denisa Kokoškova Charles University in Praque, Faculty of Pharmacy in Hradci Králové Department of Pharmaceutical Chemistry and Drug Control In this thesis was optimized determination method of salicylic acid, as the main decomposition product, from acetylsalicylic acid, which is presented in Acylpyrin, Acylcoffin and Acifein. For evaluation was used high performance liquid chromatography with electrochemical detection. Through monolithic column was analyzed Phenomenex 100 x 4,6 mm, Onyx monolithic C8. Optimization and verifying of suggested conditions electrochemical detection was focused on exploration of mobile phase and sample dissolvent. Suitable mobile phase was 50mM phosphate buffer liquid (pH 2,5) and acetonitrile in ration 80 : 20. Flowing throw column was 1ml/min, temperature 25řC, injected volume 10 μl. Electrical potential was adjusted to values E1= 300 mV, E2= 850 mV. Range was 1 μA. Optimized method was validated, parameters were precision, accuracy, linearity, specificity, robustness, limit of quantitation and limit of detection. The sample stability of Acylpyrin tablets was monitored for 48 hours.