Optimalizace SFC metody pro chirální screening

Abstract

2 ABSTRAKT Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra analytické chemie Kandidát: Pavel Jakubec Školitel: doc. PharmDr. Lucie Nováková PhD. Název diplomové práce: Optimalizace SFC metody pro chirální screening Byla navržena metoda pro účinný chirální screening 37 chirálních párů analytů rozličných základních struktur a acidobazických vlastností. Měření pomocí SFC systému Acquity UPC2 s PDA detektorem probíhalo na chirálních polysacharidových kolonách s částicemi 2,5 μm nebo 3 μm. Rychlost průtoku mobilní fáze byla vzhledem k tlakovým limitům většiny kolon 2,0 ml/min. Separace analytů probíhala gradientovou elucí s udržováním teploty kolony na 40řC a ABPR tlaku 12MPa. Pro primární screening bylo zvoleno 10 mobilních fází, z nichž 2 nejlépe hodnocené byly použity pro veškeré testované kolony. Ekvivalence kolon se stejnými chirálními selektory stacionárních fází od různých výrobců nebyla potvrzena. Vzhledem ke složitosti mechanismů chirálních separací nebylo možné odvodit obecně platná pravidla pro výběr kolony a mobilní fáze. Kolona s největším počtem separovaných enantiomerů byla Chiralcel OD-3 s modifikátorem IPA + 0,1% TFA,DEA (22,5 separace z 37). Z celkového procentuálního hodnocení kolon zahrnujícího rozlišení a tvary píků byla nejlepší kolonou Chiralcel OD-3 s...

3 ABSTRACT Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Pavel Jakubec Supervisor: Assoc. Prof. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Title of Diploma Thesis: Optimization of SFC method for chiral screening Method for effective chiral screening was developed for 37 chiral pairs of compounds of different structures and acid-base properties. Measurement was performed on SFC system Acquity UPC2 with PDA detector, using chiral polysacharides columns with particles 2.5 μm or 3 μm. Mobile phase flow was set to 2.0 ml/min due to the maximum pressure limits of most of the tested columns. Gradient elution with column temperature set to 40řC and ABPR pressure of 12 MPa was used. For primary screening 10 mobile phases were chosen, from which 2 best were used for all of the tested columns. An equivalence of columns with the same chiral selectors phase from different manufacturers was not confirmed. Considering the complexity of chiral recognition mechanisms general rules for the choice of the columns or mobile phase could not been clearly defined. Chiralcel OD-3 with IPA + 0.1% TFA,DEA was column with the most separated enantiomers. Chiralcel OD-3 with MeOH + 0.1% TFA,DEA was the best column considering overall percentual scale including the resolution and...