Využití moderních separačních metod pro klinické účely

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Analytické chemie Kandidát Mgr. Barbora Honegrová Školitel prof. RNDr. Petr Solich, CSc. Název disertační práce Využití moderních separačních metod pro klinické účely Předložená práce se zabývá vývojem metod pro stanovení vitamínů A a E v biologickém materiálu pomocí kapalinové chromatografie. V teoretickém úvodu jsou popsány bioanalytické přístupy ke stanovení analytů ze vzorku v komplexních matricích - zejména problematika úpravy vzorku před analýzou, separační chromatografické přístupy využívané v analýze a dále jsou zevrubně diskutovány principy validace bioanalytických metod. Cílové analyty jsou charakterizovány jak z chemického, tak funkčního hlediska. Experimentální část obsahuje tři oddíly. Dva se zabývají vývojem chromatografických metod s cílem zjistit nejvhodnější podmínky pro stanovení vitamínu A a E v různých biologických materiálech - sérum, lipoproteinové vrstvy a mateřské mléko v klinickém hodnocení v rámci Fakultní nemocnice Hradec Králové. Třetí část pak sleduje stabilitu vitamínů v mateřském mléce a vliv pasterizace (62,5 řC po dobu 20 minut) a skladování na jejich hladiny. 1. Byla provedena studie vhodnosti různých typů UHPLC kolon (monolitická kolona II. generace, kolony plněny celoporézními a povrchově...

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical chemistry Candidate Mgr. Barbora Honegrová Supervisor prof. RNDr. Petr Solich, CSc. Title of Doctoral Thesis Using of modern separation methods for clinical practice This work is focused on the development of methods for the determination of vitamin A and E in biological materials using liquid chromatography. The theoretical background describes bioanalytical approaches to the determination of analytes from complex matrices. Sample preparation before analysis, chromatographic separation approaches and the validation of bioanalytical methods are discussed. The structure and biological function of target analytes are characterized. The experimental part contains three sections, two of them focus on the development of new chromatographic methods for the determination of vitamin A and E in biological samples such as serum, lipoprotein layers and breast milk. The aim is to find the most suitable conditions for the chromatographic separation of target analytes that will be used for clinical trials in University Hospital in Hradec Králové. The third section is concerned with monitoring the stability of vitamins in breast milk as well as the influence of pasteurisation and storage on levels of the target vitamins....