Sekundární metabolity rostlinných kultur in vitro I

Abstract

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakognosie Kandidát: Pavlína Zlochová Školitel: PharmDr. Marie Kašparová, Ph.D. Název diplomové práce: Sekundární metabolity rostlinných kultur in vitro I. Klíčová slova: Suspenzní kultura, Trifolium pratense, fytoestrogeny, flavonoidy, isoflavonoidy Explantátové kultury jsou zdrojem sekundárních metabolitů rostlin. Avšak produkce sekundárních metabolitů bývá u explantátových kultur nízká. Produkce může být zvýšena metodou zvanou elicitace. Vhodný elicitor přidaný do kultivačního média vede u rostliny ke genové expresi a produkci sekundárních metabolitů jako obranná reakce na působící stresor. Cílem této práce bylo sledování vlivu chloridu sodného na produkci flavonoidů a isoflavonoidů u suspenzní kultury Trifolium pratense L. (varieta Tempus). Kultura byla kultivována na živném médiu dle Gamborga. Médium bylo obohaceno o 2 mg.l-1 2,4-dichlorfenoxyoctové kyseliny a 2 mg.l-1 6-benzylaminopurinu. Kultivace probíhala při 25řC a fotoperiodě 16 hodin světlo/8 hodin tma. Následně bylo provedeno stanovení flavonoidů dle Českého lékopisu 2009 a isoflavonoidů metodou HPLC. Nejlepší elicitační účinek na produkci flavonoidů byl zaznamenán po 3 i 7denní elicitaci u koncentrace 175 mmol.l-1 chloridu sodného. Obsah se navýšil o 67 a 101 % ve...

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmacognosy Candidate: Pavlína Zlochová Supervisor: PharmDr. Marie Kašparová, Ph.D. Title of diploma thesis: Secondary metabolites of plant cultures in vitro I. Key words: Suspension cultures, Trifolium pratense, phytoestrogens, flavonoids, isoflavonoids Explant cultures are source of plant secondary metabolites. Nevertheless the production of secondary metabolites is usually low in explant cultures. This production can be increased by elicitation metods. Suitable elicitor is added into the cultivate medium and leads to gene expression and production of secondary metabolites. The aim of this study was to observe the influence of sodium chloride on the production of flavonoids and isoflavonoids by the Trifolium pratense L. suspension culture (Tempus variety). The culture was cultivated on Gamborg nutriet medium with addition of 2 mg.l-1 2,4- dichlorophenoxyacetic acid and 2 mg.l-1 6-benzylaminopurine. Cultivation proceed in 25řC temperature and 16 hours light/8 hours dark period. Then determination of flavonoids in according to Czech Pharmacopoeia 2009 and the determination of isoflavonoids by HPLC method was performed. The best elicitation effect on the production of flavonoids was 175 mmol.l-1 of sodium chloride after a 3...