Analytické hodnocení léčiv s využitím HPLC I.

Abstract

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Studentka: Hana Dobrá Školitel: RNDr. Milan Mokrý, CSc. Téma diplomové práce: Analytické hodnocení léčiv s využitím HPLC I. Pro vývoj chromatografických podmínek separace suprofenu na klasických C18 kolonách, byly použity čtyři různé kolony. Nejvhodnější se ukázala kolona LiChroCART R 125-4 HPLC Cartridge, LiChrospher® 100 RP - 18, 5 µm. Bylo též vyzkoušeno mnoho různých mobilních fází, jako nejvhodnější byla vybrána mobilní fáze složená z ACN a dihydrogenfosforečnan-draselného vodného pufru v poměru 35:65 o pH 3,03. Při tomto poměru byl výsledný retenční čas suprofenu 7,8 minuty. Také byl hledán vhodný vnitřní standard. Z několika zkoušených látek byl vybrán jako nejvhodnější naproxen, který se eluoval za píkem suprofenu a poskytoval separovaný pík. Dále následovalo dlouhé hledání vhodných podmínek pro separaci enantiomerů suprofenu. Nakonec byl suprofen separován za normálního módu na koloně Chiralcel OD-R, 0,46 cm x 25cm, od firmy Daicel chemical industries s použitou mobilní fází hexan a propan-2-ol v poměru 98 : 2 s přídavkem 0,6 ml kyseliny octové. Při průtoku 0,5 ml/min byly získány retenční časy okolo 60 minut. Zvýšením rychlosti průtoku se dobu analýzy podařilo zkrátit až na 25 minut....

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmaceutical Chemistry and Drug Analysis Student: Hana Dobrá Supervisor: RNDr. Milan Mokrý, CSc. Title of master's thesis: Analytical evaluation of drugs by using HPLC For the development of chromatographic conditions for suprofen separation were used four conventional different C18 columns. Most suitable appeared column is LiChroCART 125-4 HPLC Cartridge R, LiChrospher 100 RP - 18, 5 mm. Many different mobile phases were used and the most appropriate was mobile phase consisting of acetonitrile and potassium phosphate aqueous buffer in ratio 35/65 with pH 3.03. By using this mobile phase suprofen's retention time was 7.8 minutes. We were also looking for a suitable internal standard. From a few used compounds as the best was chosen naproxen, which was eluted behind the peak of suprofen and provided a separated peak. Many conditions for the chiral separation of suprofen's enantiomers were tried. Finally, suprofen was separated by normal phase mode on a Chiralcel OD-R, 0.46 cm x 25 cm, from Daicel Chemical Industries using a mobile phase of hexane and propan-2-ol in a ratio of 98:2, with the addition of acetic acid at volume 0.6 millilitres, at a flow rate 0.5 ml / min, retention times take about 60 minutes. Analysis was reduced...