Vliv jednotlivých módů TOF analyzátoru na linearitu a citlivost UHPLC-HRMS metody

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Jakub Halad Školitel: RNDr. Hana Vlčková, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv jednotlivých módů TOF analyzátoru na linearitu a citlivost UHPLC-HRMS metody Tato diplomová práce se zabývá porovnáním čtyř módů (senzitivní mód, rozlišovací mód, mód s vysokým rozlišením a rozšířeným rozlišením) hybridního analyzátoru Q-TOF ve spojení s UHPLC systémem. Pro danou studii bylo zvoleno celkem 10 analytů. Jednalo se o 5 statinů a jejich interkonverzní produkty. UHPLC metoda byla převzata z dříve vyvinuté multistatinové metody, nicméně podmínky iontového zdroje byly znovu optimalizovány. Vyvinutá metoda byla použita pro měření standardní a matricové kalibrační křivky ve čtyřech rozlišovacích módech analyzátoru (senzitivní a rozlišovací mód, mód s vysokým rozlišením a rozšířeným rozlišením). Obohacené lyofilizované sérum upravené pomocí proteinové precipitace bylo použito pro matricovou kalibrační křivku. Na závěr byly jednotlivé módy porovnány na základě linearity a citlivosti. Vliv jednotlivých rozlišovacích módů na korelační koeficient nebyl pozorován. Naopak použití jednotlivých rozlišovacích módů mělo vliv na citlivost metody. V pozitivním módu bylo dosaženo nižších hodnot LOQ u standardní kalibrační křivky...

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Jakub Halad Supervisor: RNDr. Hana Vlčková, Ph.D. Title of thesis: An influence of individual modes of TOF analyzer on linearity and sensitivity of UHPLC-HRMS methods This diploma thesis deals with the comparison of four modes (sensitive mode, resolution mode, high resolution mode, enhanced resolution mode) of the hybrid analyser Q- TOF connected with UHPLC system. Totally, ten analytes were selected for this study. It was a group of 5 statins and their interconversion products. UHPLC method was borrowed from previous developed multistatin method however, ESI conditions were optimized. Developed method was used to measure standard calibration curves and matrix calibration curves in four analyser modes (sensitive, resolution, high resolution and enhanced mode). Spiked lyophilized serum treated by the protein precipitation was used for matrix calibration curve. Finally, the individual analyser modes were compared due to the linearity and sensitivity The effect of individual analyser modes on the correlation coefficient was not observed. On the other hand, analyser modes influenced the method sensitivity. In positive mode, lower LOQ values were obtained for the standard calibration curves...