Western blot analýza vybraných molekul oxidačního stresu v aortě apoE/LDLR deficientního myšího modelu

Abstract

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biological and Medical Sciences Western blot analysis of selected oxidative stress markers in aorta of apoE/LDLR deficient mice Author of diploma thesis: Bc. Martina Čermáková Supervisor: PharmDr. Jana Rathouská, Ph.D. Background: The aim of this diploma thesis was to evaluate expression of selected oxidative stress molecules (SOD-3, iNOS, catalase, HO-1) in cardiac aorta and nitrate and nitrite levels in plasma in two groups of mice. These two groups of mice varied in genetic features - the monitored group was, compared to control group of mice, deficient for apolipoprotein E and LDL receptor. Methods: For the study, 2 months old male mice were fed a standard rodent diet. The males were divided into two groups - control (C57BL/6J) and monitored (apoE-/- /LDLR- /- ). Western blot method was used to evaluate and quantify iNOS, SOD-3, catalase and HO-1 molecules in the aorta. HPLC method was used to quantify nitrate and nitrite levels in plasma. Result: HPLC method did not show statistically significant differences in the nitrate and nitrite levels in plasma between the two groups of examined mice. Western blot analysis of aortic samples showed statistically significantly higher SOD-3 expression (208.39 %) and a significantly...

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologických a lékařských věd Western blot analýza vybraných molekul oxidačního stresu v aortě apoE/LDLR deficientního myšího modelu Autor diplomové práce: Bc. Martina Čermáková Vedoucí práce: PharmDr. Jana Rathouská, Ph.D. Cíl práce: Cílem této diplomové práce bylo zhodnotit expresi vybraných molekul oxidačního stresu (SOD-3, iNOS, kataláza, HO-1) v aortě a hladiny nitrátů a nitritů v plazmě u dvou skupin myší. Tyto dvě skupiny myší se lišily v genetické výbavě - sledovaná skupina měla, oproti skupině kontrolní, vypnuté geny pro apolipoprotein E a LDL receptor. Metody: Pro studii se použili 2 měsíce staří samci myší, kteří byli krmeni standartní dietou pro hlodavce. Samci byli rozděleni do dvou skupin - kontrolní (C57BL/6J) a sledované (apoE-/- /LDLR-/- ). Pro zhodnocení a kvantifikaci molekul iNOS, SOD-3, kataláza a HO- 1 v aortě byla použita metoda Western blot. Pro kvantifikaci nitrátů a nitritů v plazmě byla užita metoda HPLC. Výsledky: Metoda HPLC neprokázala statisticky významné rozdíly v hladinách nitrátů a nitritů v plazmě mezi oběma hodnocenými skupinami myší. Western blot analýza tkáně aorty prokázala statisticky významně vyšší expresi SOD-3 (208,39 %) i signifikantně vyšší expresi iNOS (207,62 %) u skupiny apoE-/-...