Enzymové testy s vázanou cholinesterázou k charakterizaci léčiv Alzheimerovy choroby

Abstract

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradci Králové Department of: Pharmaceutical chemistry and drug control Consultant: prof. PharmDr. Martin Doležal, Ph.D. Supervisor specialist: pplk. prof. RNDr. Miroslav Pohanka, Ph.D., DSc. Student: Miriama Dulinová Title of diploma Thesis: Enzyme assays with bound cholinesterase to characterize drugs for Alzheimer's disease. Alzheimer's disease is a progressive and irreversible neurodegenerative brain disease, which is globally connected with the most common cause of dementia. The pathophysiology of the disease is not yet fully understood. Treatment of this disease is for the time being only symptomatic and is represented by inhibitors of the acetylcholinesterase. The acetylcholinesterase inhibitors are at present practically the only active substances that mitigate the effects of the Alzheimer's disease. In this thesis, we have investigated the ability to inhibit already known AChE inhibitors (rivastigmine, donepezil, galantamine, tacrine), that have been tested for their activity. We tested the effectiveness of the inhibitors with loose acetylcholinesterase (via the reference method) and subsequently with the immobilised acetylcholinesterase in clear gelatine, but also with added netted agents. (glutaraldehyd, EDC). For the purposes of our...

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Farmaceutickej chémie a kontroly liečiv Vedúci práce: prof. PharmDr. Martin Doležal, Ph.D. Školiteľ špecialista: pplk. prof. RNDr. Miroslav Pohanka, Ph.D., DSc. Diplomant: Miriama Dulinová Názov diplomovej práce: Enzýmové testy s viazanou cholínesterázou k charakterizácií liečiv Alzheimerovej choroby. Alzheimerova choroba je progresívne a ireverzibilné neurodegeneratívne ochorenie mozgu, ktoré je celosvetovo spájané s najčastejšou príčinou demencie. Patofyziológia ochorenia nie je zatiaľ úplne pochopená. Liečba tohto ochorenia je zatiaľ symptomatická a je reprezentovaná inhibítormi acetylcholínesterázy. Inhibítory acetylcholínesteráz sú v súčasnosti prakticky jediné účinné látky, ktoré zmierňujú dôsledky Alzheimerovej choroby. V tejto práci sme sa venovali skúmaniu schopnosti inhibície už známych inhibítorov AChE (rivastigmín, donepezil, galantamín, takrín), u ktorých bola overená ich aktivita. Otestovali sme účinnosť inhibítorov s voľnou acetylcholínesterázou (referenčná metóda) a potom s imobilizovanou acetylcholínesterázou v čistej želatíne, ale aj s pridanými sieťovacími činidlami (glutaraldehyd, EDC). Pre náš experimentálny výskum sme využili spektrofotometrické stanovenie aktivít cholínesteráz, pomocou dobre známej Ellmanovej...