Stanovení floridzinu a dalších fenolických látek v listech jabloní pomocí HPLC

Abstract

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Anežka Adamcová Školitel: Doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D Název: Stanovení floridzinu a dalších fenolických látek v listech jabloní pomocí HPLC Tato diplomová práce je rozdělena na teoretickou a praktickou část. Teoretická část se zabývá charakterizaci floridzinu a praktická část je zaměřena na HPLC stanovení floridzinu, floretinu, kyseliny chlorogenové a kvercitrinu v listech různých odrůd jabloní. Rovněž byly charakterizovány tyto látky v pupenech a kůře jabloní. Práce se zabývá optimalizaci a validaci nově vytvořené chromatografické metody. K analýze byla použita kolona YMC-Triart C18 ExRS 150 x 4,6 mm x 5μm, 8 nm. Byla využita gradientová eluce s mobilní fázi tvořenou organickou složkou (ACN) a vodnou složkou s kyselinou fosforečnou (pH = 2,2). K detekci byl využit DAD detektor při vlnových délkách 280 nm, 327 nm a 354 nm. Teplota kolonového prostoru byla 30 řC, nástřik byl 1 μl a průtoková rychlost 1 ml/min. Byly separovány a identifikovány fenolické látky ze vzorků listí pocházejících z různých odrůd rodu Malus. Každá odrůda byla extrahována ve 2 typech extrakčního činidla pro zjištění účinnějšího. Teoretická část se kromě charakterizace fenolických látek zabývá chemickou strukturou floridzinu,...

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Bc. Anežka Adamcová Supervisor: doc. RNDr. Dalibor Šatínský, Ph.D. Title of Diploma Thesis: Determination of floridzin and other phenolic compounds in apple leafs by HPLC This diploma thesis is divided to theoretical and experimental part. The theoretical part is focused on phloridzin and its characterization. In the experimental part the phloridzin, phloretin, chlorogenic acid, rutin and quercitrin were analyzed with a high performance liquid chromatography (HPLC) method from leaves of genus Malus. These compounds were identified in barks and buds of apple trees. The experimental part deals with optimization and validation of method too. Column YMC-Triart C18 ExRS 150 x 4.6 mm x 5um, 8 nm and gradient elution consisting of organic part of ACN and water part with phosphoric acid (pH= 2.2) was used for analysis. The detection was performed by DAD detector at wavelengths 280 nm, 327 nm a 354 nm. The temperature of column space was 30 řC, injection volume was 1 μl and flow rate 1 ml/min. Phenolic compounds from apple leaves originating from various cultivars were separated and identified. Each cultivar was extracted by 2 types of extraction reagents (methanol with formic acid or acetic acid) to find...