Vplyv metódy prípravy vzorky na výskyt matricových efektov pri UHPSFC-MS analýze vitamínu E

Abstract

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Analytickej chémie Kandidát: Lucia Vasilisková Školiteľ: doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Názov diplomovej práce: Vplyv metódy prípravy vzorky na výskyt matricových efektov pri UHPSFC-MS analýze vitamínu E Cieľom práce bola optimalizácia chromatografickej metódy na stanovenie 8 rôznych derivátov vitamínu E, ktorá by poskytovala lepšie výsledky analýzy ako dve už existujúce metódy; vysoko rýchlostná (HS) a vysoko rozlišovacia (HR). Testované boli nové stacionárne fázy (SF) Torus (dietylamin, 1-aminoantracen, 2-pikolylamin a diol), za podmienok: CO2:MeOH 98:2, prietok 2 ml/min, nástrek 2 µl, teplota kolony 40řC, tlak 12,9 MPa, prídavná kvapalina 0,1% NH4OH v metanole. Na 2-PIC kolone boli skúšané modifikátory mobilnej fázy (etanol, isopropanol a zmes acetonitrilu s metanolom v pomere 1:1). Porovnával sa aj vplyv aditív k mobilnej fáze (0,1% NH4OH, 10mM mravenčan amónny, 10mM octan amónny a 2% H2O). V ďalšej časti práce bola optimalizovaná metóda na úpravu vzorky s cieľom zníženia alebo eliminácie matricových efektov (ME). Testovaná bola metóda riedenia pomocou rozpúšťadiel - H2O, 50% acetonitril (ACN) a 75% ACN. Najvhodnejším rozpúšťadlom boli vzorky moču 10, 20, 50 a 100 násobne nariedené a následne analyzované za HS a HR...

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Lucia Vasilisková Supervisor: doc. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Title of Diploma Thesis: Influence of sample preparation method on occurence of matrix effects in UHPSFC-MS analysis of vitamin E The goal of this thesis was to optimize the chromatographic method for the determination of 8 different isomers of vitamin E that would provide better analysis results than two existing methods; high speed (HS) and high resolution (HR). New Torus stationary phases (SP) were tested (diethylamine, 1-aminoantracene, 2-picolylamine and diol under conditions: CO2:MeOH 98:2, flow rate 2 ml/min, injection volume 2 µl, column temperature 40řC, BPR 12.9 MPa, make-up solvent 0.1% NH4OH in MeOH. The modifiers (ethanol, isopropanol and a 1:1 mixture of acetonitrile/methanol) were tested on the 2-PIC column. The effect of additives in the mobile phase was also compared (0.1% NH4OH, 10mM ammonium formate, 10mM ammonium acetate and 2% H2O). The next part of the thesis describes the development of the sample preparation method to reduce or eliminate the matrix effects. Dilution method was tested using solvents - H2O, 50% acetonitrile (ACN) and 75% ACN. Urine samples were 10, 20, 50 and 100 times diluted by the most...