Optimalizace metabolomického postupu pro porovnání profilů nečistot tablet levothyroxinu s využitím UHPLC-HRMS

Abstract

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical Chemistry Candidate: Bc. Anna Hrušková Supervisor: prof. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Title of Diploma Thesis: Optimization of metabolomic workflow for a comparison of impurity profiles of levothyroxin tablets using UHPLC-HRMS The aim of this diploma thesis was to compare 3 designs of measuring the impurity profiles of levothyroxine tablets and to evaluate the most suitable procedure. Analyses were performed by ultra-high performance liquid chromatography coupled with high resolution mass spectrometry. Levothyroxine drug products are used to supplement reduced thyroid function. In this work, 23 batches of tablets from 2 different manufacturers were analysed. The optimization of the tablet sample and internal standard preparation method and the compilation of 3 measurement designs using data from the preliminary screening was the first step. The designs were compiled as targeted metabolomics analyses. Then, a targeted analysis of 4 known impurities in designs 1 and 2 was performed, which was semi-quantitative (relative content of impurity to levothyroxine content). Differences in impurity content between designs were also evaluated. The next step was to compare individual designs in terms of variability, which was...

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Bc. Anna Hrušková Školitel: prof. PharmDr. Lucie Nováková, Ph.D. Název diplomové práce: Optimalizace metabolomického postupu pro porovnání profilů nečistot tablet levothyroxinu s využitím UHPLC-HRMS Cílem této diplomové práce bylo porovnání 3 designů měření profilů nečistot tablet levothyroxinu a zhodnocení nejvhodnějšího postupu pro metabolomiku. Analýzy byly provedeny pomocí ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie ve spojení s vysokorozlišovací hmotnostní spektrometrií. Levothyroxin je lék užívaný při snížené funkci štítné žlázy. V této práci bylo analyzováno 23 šarží tablet od 2 různých výrobců. Prvním krokem byla optimalizace metody přípravy vzorku tablet a interního standardu a sestavení 3 designů měření pomocí dat z předběžného screeningu. Designy byly sestaveny jako cílené metabolomické analýzy. Poté byla provedena cílená analýza 4 známých nečistot v designu 1 a 2, která byla semikvantitativní (relativní obsah nečistoty k obsahu levothyroxinu). Byly také zhodnoceny rozdíly v obsahu nečistot mezi designy. Dalším krokem bylo porovnání jednotlivých designů z hlediska variability, která byla hodnocena na základě změny odezvy interního standardu mezi jednotlivými nástřiky. Posledním krokem bylo...