Oxidativní stres v lidských fibroblastech po expozici titanovými a grafenovými nanočásticemi

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Bc. Magdalena Koropecká Supervisor: prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Consultant: RNDr. Ladislava Schröterová, Ph.D. Title of diploma thesis: Oxidative stress in human fibroblasts after exposure to titanium and graphene nanoparticles Nanoparticles, or particles which have at least one dimension in the size range of 1-100 nm in size, have been studied extensively. Especially in recent years, the number of publications dealing with the toxic effects of nanoparticles has increased rapidly. One of the main mechanisms involved in the toxic effect of nanoparticles is the formation of reactive oxygen species and the associated oxidative stress. This thesis aimed to determine the degree of oxidative stress in human fibroblasts after exposure to titanium and graphene nanoparticles, which correlates closely with the experimentally measured level of reduced glutathione in the affected cells. For this purpose, two optimized methods were used, namely the determination of glutathione by monochlorobimane and the determination of total and oxidized glutathione by enzymatic recycling reaction. One part of the cells was treated with two forms of unmodified graphene nanoplates of different lateral sizes (80-300...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Magdalena Koropecká Školitel: prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Konzultant: RNDr. Ladislava Schröterová, Ph.D. Název diplomové práce: Oxidativní stres v lidských fibroblastech po expozici titanovými a grafenovými nanočásticemi Nanočástice neboli částice, které mají alespoň jeden rozměr v rozsahu velikostí 1-100 nm, jsou předmětem rozsáhlého studia. Zejména v posledních letech počet publikací, které se zabývají toxickými účinky nanočástic, rychle stoupá. Jedním z hlavních mechanismů, které jsou zapojeny do toxického účinku nanočástic, je tvorba reaktivních forem kyslíku a s ní spojený oxidační stres. Cílem této diplomové práce bylo zjistit míru oxidačního stresu v lidských fibroblastech po expozici titanovými a grafenovými nanočásticemi, který úzce koreluje s experimentálně naměřenou hladinou redukovaného glutathionu v ovlivněných buňkách. Za tímto účelem bylo využito dvou optimalizovaných metod, a to stanovení glutathionu pomocí monochlorobimanu a stanovení celkového a oxidovaného glutathionu pomocí enzymatické recyklační reakce. Část buněk byla ovlivněna dvěma formami nemodifikovaných grafenových nanoplátků o různých laterálních velikostech (80-300 a 250-400 nm) po dobu 24 a 48 hodin. U testovaných...