Optimization of the method for quantification of lipids in human corneocyte lipid envelope

Abstract

6 ABSTRAKT Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra organické a bioorganické chemie Kandidát: Seyedmohammad Khatibi Školitel: PharmDr. Lukáš Opálka, Ph.D. Konzultant: RNDr. Martina Navrátilová, Ph.D. Název diplomové práce: Optimalizace metody kvantifikace lipidů lidské korneocytální lipidové obálky Ceramidy jsou esenciální sfingolipidy v kůži, které hrají klíčovou roli v bariérové funkci a buněčné regulaci. Cílem této studie bylo optimalizovat izolaci kovalentně vázaných ceramidů ze stratum corneum kůže prostřednictvím vývoje a zdokonalení extrakčních a saponifikačních postupů. Zaměření bylo konkrétně na ceramidy typu NS (volné lipidy), OS, OH, OdS a OP, získané ze vzorků tří zdravých jedinců. Z každého dobrovolníka bylo odebráno osm vrstev stratum corneum, které byly spojeny do jednoho vzorku. Postupy izolace byly rozděleny do tří hlavních kroků: extrakce volných lipidů, čištění zbývající pelety a saponifikace kovalentně vázaných lipidů. Postupy byly systematicky testovány za různých podmínek v průběhu sedmi experimentů, aby byly stanoveny optimální parametry pro extrakci ceramidů. Počáteční experimenty ukázaly, že vysoké teploty během extrakce a saponifikace vedly k významné degradaci kovalentně vázaných lipidů. První experiment, který využíval vysoké teploty, vedl k úplné...