Přirozené inhibitory koagulačních faktorů, jejich úloha v prevenci trombózy a v procesech imunitní odpovědi, angiogeneze a karcinogeneze.

Abstract

Physiological anticoagulants play a significant regulatory role in hemostasis. Due to numerous functions not only in hemostasis regulation, we focused specifically on protein S (PS) in this work, which we divided into three parts. The aim of the first part was to identify causal mutations in the PROS1 gene in a cohort of patients with inherited PS deficiency using Sanger sequencing and multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA). PS deficiency is a significant known risk factor for venous thrombosis; however, considering the structure of PS, we hypothesized that mutations in certain parts of PS would carry larger thrombotic risk than in others. Therefore, we further analyzed the influence of mutation position on thrombosis risk in this cohort of patients with inherited PS deficiency. In the second part of the work, our goal was to describe the observed acquired PS deficiencies in a cohort of patients from the Institute of Hematology and Blood Transfusion in Prague with hematological malignancies. Finally, in the third part, the aim was to verify the stability of PS and other coagulation parameters in frozen plasma conditions, which has important implications for both daily laboratory practice and the diagnosis of PS deficiency. Causal mutations in the PROS1 gene were found in 73/79...

Přirozené inhibitory koagulace jsou významnou regulační složkou hemostázy. Vzhledem k množství funkcí nejen v regulaci hemostázy jsme se v této práci zaměřili konkrétně na protein S (PS) a práci jsme rozdělili do tří dílčích částí. Cílem první části bylo nalézt kauzální mutace v genu PROS1 u kohorty pacientů s vrozeným deficitem PS pomocí Sangerova sekvenování a metody MLPA (multiplex ligation-dependent probe amplification). Deficit PS je významným známým rizikovým faktorem pro vznik žilní trombózy, nicméně vzhledem k struktuře PS lze formulovat hypotézu, že mutace v určitých částí PS budou rizikovější než v jiných. Proto jsme dále analyzovali vliv polohy mutace na riziko trombózy u v této kohortě pacientů s vrozeným deficitem PS. V druhé části práce bylo naším cílem popsat pozorované získané deficity PS u kohorty pacientů Ústavu hematologie a krevní transfuze Praha s hematologickými malignitami. Na závěr ve třetí části bylo cílem ověřit stabilitu PS a dalších koagulačních parametrů v podmínkách zmražené plazmy, což má důležitý přesah jak do každodenní laboratorní praxe, tak pro diagnostiku deficitu PS. Kauzální mutace v genu PROS1 byla nalezena u 73/79 (92 %) pacientů. Celkem bylo identifikováno 34 různých mutací, z nichž 15 nebylo dosud popsáno. Výskyt mutací nevykazuje soustředění v žádné...