Immunohistochemická analýza exprese SMAD proteinů u experimentální aterogeneze

Abstract

Michaela Koubová Immunohistochemická analýza exprese SMAD proteinů u experimentální aterogeneze Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Cíl práce: Cílem této práce bylo zjistit a popsat expresi SMAD 2/3 v aterosklerotických plátech myší a nalézt rozdíly v expresi u zvířat krmených standardní dietou a dietou obohacenou o atorvastatin. Cílem bylo prokázat jestli atorvastatin ovlivňuje expresi SMAD 2/3 bez hypolipidemických účinků. Metody: Použili jsme samice kmene C57BL/6J s dvojitým deficitem apolipoproteinu E a LDL-receptoru. Byla provedena biochemická analýza vzorků krve, histologická a imunohistochemická analýza odebraných segmentů tkáně, které tvořila aorta spolu s horní polovinou srdce. Pro detekci exprese SMAD 2/3 byla použita metodika EnVision s detekcí pomocí DAB. Výsledky: Pomocí biochemické analýzy jsme zjistili, že osmitýdenní podávání atorvastatinu vedlo ke statisticky významnému zvýšení hladiny celkového cholesterolu. Histologická analýza ukázala, že podávání atorvastatinu vedlo k signifikantnímu poklesu velikosti aterosklerotických plátů ve srovnání s neléčenou skupinou. Imunohistochemická analýza prokázala expresi SMAD 2/3 v aterosklerotických plátech obou skupin. Nebyl ale nalezen výrazný rozdíl v expresi SMAD 2/3 u těchto dvou...

Michaela Koubová Immunohistochemical analysis of SMAD protein expression in experimental atherogenesis Diploma thesis Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Pharmacy Background: The aim of this diploma thesis was to analyze SMAD 2/3 expression in mice atherosclerosis lesions and find differences in the expression between animals feeding with standard diet and diet with addition of atorvastatin. The aim was demonstrate whether atorvastatin influences SMAD 2/3 expression without hypolipidemic effects. Methods: Female C57BL/6J apolipoprotein E and LDL-receptor double deficient mice were used in the study. Biochemical analysis of blood samples, histological and immunohistochemical analysis of aorta were performed. For identification of SMAD 2/3 expression was used EnVision method with DAB visualization. Results: Biochemical analysis revealed that the eight-week administration of atorvastatin resulted in a statistically significant increase in total cholesterol. Histological analysis showed that administration of atorvastatin resulted in significant reductions in the size of atherosclerotic plaques compared with untreated group.Immunohistochemical analysis showed SMAD 2/3 expression in atherosclerotic plaques in both groups.Significant differences in the expression of SMAD...