Sledování markerů oxidačního stresu u modelu chronického zánětu tlustého střeva

Abstract

Crohnova nemoc a ulcerózní kolitida se řadí do idiopatických střevních zánětů. NF - κB představuje skupinu pěti různých proteinů - p65 (RelA), c-Rel, RelB, p50 a p52. NF - κB je schopen nastartovat expresi různých prozánětlivých genů a ovlivnit tak proces mukosálního zánětu, také zprostředkovává různé specifické buněčné děje. Bilirubin je endogenní látka, u které byly zjištěny antioxidační a protizánětlivé účinky, které by mohly ovlivnit proces zánětu a mít protektivní účinek. Tato diplomová práce se zabývala vypracováním metodiky pro detekci nukleárního transkripčního faktor kappa B na parafinových řezech a sledováním jeho exprese ve stěně tlustého střeva normobilirubinemických a hyperbilirubinemických (Gunn kmen) potkanů po indukci chronického zánětu pomocí imunohistochemických metod. Ve studii bylo použito 8 potkanů kmene Gunn (G+ ) a 8 potkanů kmene Wistar (K+ ), kterým byl dlouhodobě podáván dextran sulfát (DSS). Sedm dnů po sobě byl do pitné vody přidáván DSS (koncentrace 2% w/v) s následným podáváním pouze pitné vody bez DSS po dobu 14 dnů. Popsaný třítýdenní cyklus se 2x zopakoval (proběhly tedy 3 cykly). Jako kontroly byli opět použiti potkani kmene Gunn (n=6) a Wistar (n=6), kteří nebyly vystaveni vlivu DSS. Výsledky imunohistochemické analýzy prokázaly detekci NF-κB receptoru ve stěně...

Crohn's disease and ulcerative colitis are both entities of inflammatory bowel disease (IBD). The nuclear transcription factor kappaB (NFκB) family consists of five different members, which are namely p65 (RelA), c-Rel, RelB, p50 and p52. NFκB has ability to promote the expression of various proinflammatory genes, to influence the course of mucosal inflammation and to mediate different cell-type specific effects. Bilirubin is an endogenous substance with anti-oxidative and anti-inflammatory effects, which influences the process of inflammation and has protective effect. This diploma thesis was aimed at conduction of methods of NFκB detection on paraffine tissue slices and observation of NFκB expression in large intestine walls of normobilirubin and hyperbilirubin rats (Gunn's variety) after chronic imunohistochemically- induced inflammation. Eight Gunn's variety rats (G+ ) and eight Wistar's variety rats (K+ ) were used in this study, all after long time administration of dextrane-sulfate (DSS). For seven following days, DSS (in concentration of 2%w/v) was added into drinkable water for these rats, followed by 14 days of clear drinkable water (without DSS) administered to rats. This three-weeks long cycle was repeated twice (3 cycles in total were completed). Six rats of both varieties (6 G+ and 6...