Porovnání částicových stacionárních fází s monolitickými při analýze vybraných farmaceutik

Abstract

Tato práce se zabývá porovnáním analytické účinnosti monolitických kolon Chromolith® (Merck) a Onyx™ (Phenomenex) s konvenčními C18 kolonami Discovery® (Supelco, Sigma-Aldrich, Praha, ČR) a LiChroCart® 125-4 Purospher 5 µm (Merck, Darmstadt, Německo) při stanovení obsahu estradiolu, estronu a hydrokortizonu (IS) v LP Estrogel gelu a při stanovení obsahu kyseliny salicylové, methylsalicylátu a ketoprofenu (IS) v přípravku Aphlox-K pasta. Složení mobilní fáze (pro analýzu Estrogel gelu je mobilní fáze složena z acetonitrilu, methanolu a vody v poměru 23:24:53 (v/v/v) a pro analýzu Aphlox-K pasty je mobilní fáze složena z methanolu, vody a kyseliny octové v poměru 50:50:1 (v/v/v) - tento poměr jednotlivých složek mobilní fáze je optimální pro dosažení potřebného rozlišení mezi jednotlivými píky). Toto složení mobilní fáze nebylo většinou vhodné pro analýzu na všech zkoušených kolonách. Proto byly poměry jednotlivých složek mobilní fáze měněny pro dosažení potřebného rozlišení mezi analyzovanými látkami (obvykle byl zvyšován podíl vody v mobilní fázi). Byly měněny i rychlosti průtoku mobilní fáze (od 0,3 - 5,0 ml/min). Bylo provedeno stanovení účinných látek, konzervačních látek, nečistot v obou přípravcích a následně byly porovnány jednotlivé retenční časy a parametry SST. Pro Estrogel gel byly nalezeny...

The performance of monolithic HPLC columns Chromolith® (made by Merck, Germany) and Onyx™ (made by Phenomenex, USA) and conventional C18 columns Discovery® (made by Supelco, Sigma-Aldrich, Prague, Czech Republic) and LiChroCart® 125-4 Purospher 5 µm (made by Merck, Germany) was tested and the comparison for two topical preparation Estrogel gel and Aphlox-K paste was made. The composition of mobile phase - for Estrogel gel analysis a mixture of acetonitrile, methanol and water (23:24:53, v/v/v) and for Aphlox-K paste analysis a mixture of methanol, water and acetic acid (50:50:1, v/v/v) - was usually not optimal for analysis at all types of columns. Thus an adjustment of components ratio was necessary for sufficient resolution of the analyzed compounds. Various flow rates (0.3 - 5.0 ml/min) and mobile phase composition (usually increasing ratio of water content) were applied. Determination of active substances, preservatives and impurities and comparison of retention times and system suitability test parameters was accomplished. For Estrogel gel analysis, following chromatographic conditions were found: using Chromolith® Flash RP18-e (25 mm x 4.6 mm), monolith column mobile phase was acetonitrile, methanol, water (16:24:60 v/v/v) and flow-rate 2.0 ml/min. Using monolith column Onyx™ Monolithic C18-e (50 mm x...