Produkce mysiho rekombinantniho prionoveho proteinu (mrPrP) a studium jeho vlastnosti

Abstract

Název práce: Produkce myšího rekombinantního prionového proteinu (mrPrP) a stu- dium jeho vlastností Autor: Anna Krejčiříková Katedra (ústav): Katedra biochemie Vedoucí diplomové práce: doc. RNDr. Jan Konvalinka, CSc. E-mail vedoucího: konval@uochb.cas.cz Konzultant: dr. Ing. Karel Holada, ÚIM 1. LF UK Abstrakt: Prionová onemocnění sice představují jen malou část ze všech známých neurode- generativních nemocí, přesto si zaslouží naši pozornost vzhledem k faktu, že se jedná o smrtelné a dosud nevyléčitelné choroby mající i potenciál způsobit vznik epidemie. Přestože se vědci tímto tématem zabývají již mnoho let, existuje stálé řada nezod- povězených otázek o mechanismu vzniku a šíření prionových onemocnění. V současnosti nejslibnější teorií, jenž vysvětluje podstatu nemoci konverzí buněčného prionového proteinu (PrPC ) v patologický prionový protein (PrPSc ), je "protein-only" hypotéza. Důležitým nástrojem při dokazování této hypotézy je mimo jiné i rekombinantní pri- onový protein. Předkládaná diplomová práce shrnuje dosavadní úspěchy v ověřování prionové hypotézy. V experimentální části se zabýváme přípravou myšího rekombi- nantního prionového proteinu (mrPrP) v bakteriích E. coli....

Title: Production of mouse recombinant prion protein and analysis of its properties Author: Anna Krejčiříková Department: Department of Biochemistry Supervisor: doc. RNDr. Jan Konvalinka, CSc., Supervisor's e-mail: konval@uochb.cas.cz Consultant: dr. Ing. Karel Holada, IIM 1stFM CU Abstract: Although prion diseases represent only a small fraction of all known neurodegenra- tive illnesses, they deserve our attention mainly due to the fact that they are lethal, incurable by today, and having a potential to cause a serious epidemic. Even though this topic has been studied for many years, there are still many unanswered questions concerning both the mechanism, and the spread of prion diseases. The most promising current theory is the protein-only hypothesis, which explains the fundamental of the ill- ness by the conversion of cellular prion protein (PrPC ) into pathological prion protein (PrPSc ). The important tool in proving this theory is also a recombinant prion pro- tein. The presented thesis summarizes existing successes in the proving of protein-only hypothesis. In the experimental part, we prepared the mouse recombinant prion pro- tein (mrPrP) in E. coli bacteria. The structure of the purified and renaturated protein was verified by CD spectroscopy. Next, we focus on the effects of the...