Extrakce na tuhou fázi a její miniaturizace metodou Lab-On-Valve pro stanovení farmaceuticky významných látek

Abstract

Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra analytické chemie Kandidát: Iva Jelínková Školitel: PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Název diplomové práce: Extrakce na tuhou fázi a její miniaturizace metodou Lab-On-Valve pro stanovení farmaceuticky významných látek Diplomová práce se zabývá vývojem metody extrakce na tuhou fázi (SPE) s využitím mikroextrakce tuhým sorbentem (MEPS) pro stanovení vitamínů A, D, E a možnostmi automatizace této metody. Stanovení bylo založeno na absorpci vitamínů na mikrokoloně MEPS, rušivé složky byly odstraněny promývacím roztokem (zředěná kyselina octová o pH 3) a byla provedena extrakce elučním roztokem (100% ACN). Detekce proběhla za pomocí UV spektrofotometru při vlnových délkách absorpčních maxim pro vitamín A - 325 nm, pro vitamín D - 265 nm, pro vitamín E - 295 nm. Metoda byla optimalizována. Byl vyvíjen program, kde byly testovány koncentrace jednotlivých vitamínů, dávkovací objemy, průtokové rychlosti a složení rozpouštědel. Po optimalizaci metody byla provedena extrakce a následné stanovení krevní plazmy fortifikované vitamíny A, D, E metodou sekvenční injekční chromatografie (SIC). Výtěžnost metody byla pro vitamín A 156,83 %, pro vitamín D 28,38 %, pro vitamín E 15,79 %. Byla hodnocena opakovatelnost, pro kterou byly použity tři...

Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Analytical chemistry Candidate: Iva Jelínková Supervisor: PharmDr. Petr Chocholouš, Ph.D. Title of diploma thesis: Solid-phase extraction and its miniaturization by method Lab-On- Valve for determination of pharmaceutical substances This thesis deals with the development of the solid-phase extraction (SPE) method with the use of microextraction by packed sorbent (MEPS) for the determination of vitamins A, D, E and the possibility to automate this method. The determination was based on absorption of vitamins on microcolumn MEPS, interfering components were removed by washing solution (dilute acetic acid of pH 3) and extraction was performed by eluent solution (100% ACN). Detection was made by UV spectrophotometer at wave lengths of absorbing maximum for vitamin A - 325 nm, for vitamin D - 265 nm, for vitamin E - 295 nm. The method was optimized. There was developed a program, where concentrations of individual vitamins, dosing volumes, flow speed and composition solvents were tested. After the optimization method there was performed the extraction and the subsequent determination of blood plasma fortified with vitamins A, D, E by the sequential injection chromatography method. Recovery of the method for vitamin A was...