Abiotická elicitace suspenzní kultury Trifolium pratense L.

Abstract

Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakognozie Kandidát: Mgr. Jitka Vaňková Školitel: PharmDr. Marie Kašparová, Ph.D. Název rigorózní práce: Abiotická elicitace suspenzní kultury Trifolium pratense L. Byl sledován vliv 24hodinové aplikace samotného elicitoru chloridu hlinitého (1 mol, 10 mol, 100 mol) a v kombinaci s chloridem vápenatým (0,1 mmol, 1 mmol, 10 mmol) a verapamilem (1 mol, 10 mol, 100 mol) na produkci flavonoidů a isoflavonoidů u 4-leté a nově odvozené suspenzní kultury Trifolium pratense L. Kultury byly kultivovány na médiu dle Gamborga s přidanou kyselinou 2,4- dichlorfenoxyoctovou (2 mg.l-1 ) s 6-benzylaminopurinem (2 mg.l-1 ), při teplotě 25řC a světelné periodě 16 hodin světlo/8 hodin tma. Maximální produkci flavonoidů (0,262 % a 0,220 %) vyvolalo u obou sledovaných kultur přidání nejslabších koncentrací chloridu hlinitého (1 µmol) a vápenatých iontů (0,01 mmol). Následné ovlivnění elicitace přidáním verapamilu jako blokátoru vápníkových kanálu se prokázalo snížením produkce sledovaných metabolitů u obou kultur pouze po aplikaci nejsilnější koncentrace 100 µmol. U nově odvozené suspenzní kultury Trifolium pratense L. byla sledována také produkce isoflavonoidů. Největší elicitační účinek na produkci genistinu (0,14 %) měla koncentrace...

Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmacognosy Candidate: Mgr. Jitka Vaňková Supervisor: PharmDr. Marie Kašparová, Ph.D. Title of Rigorous Thesis: Abiotic elicitation of suspension culture of Trifolium pratense L. We investigated the effect of a 24-hour application of aluminum chloride elicitor alone (1 mol, 10 mol, 100 mol) and in combination with calcium chloride (0,1 mmol, 1 mmol, 10 mmol) and verapamil (1 mol, 10 mol, 100 mol) on the production of flavonoids and isoflavonoids in 4-year-old and newly derived suspension cultures of Trifolium pratense L. Cultures were cultivated on a medium according to Gamborg added 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2 mg.l-1 ) with 6-benzylaminopurine (2 mg.l-1 ) at 25 ř C and a light period of 16 hours light / 8 hours dark. The maximal production of flavonoids (0.262% and 0.220%) resulted in two observed groups of cultures add the weakest concentration of aluminum chloride (1 µmol) and calcium ions (0.01 mmol). Subsequent addition of elicitation effect of verapamil as a calcium channel blocker has been demonstrated by reducing the production of metabolites observed in both cultures only after the strongest concentration of 100 µmol. The newly derived suspension cultures of Trifolium pratense L. was also...