Detekce extracelulárních mikroRNA v mateřské cirkulaci - diagnostika a prognostika těhotenských komplikací

Abstract

MikroRNA (miRNA) jsou krátké nekódující RNA o délce 18 až 25 nukleotidů, které posttranskripčně regulují genovou expresi. Exprese některých miRNA je tkáňově specifická. Vycházela jsem z předpokladu, že těhotenské komplikace související s placentární insuficiencí by mohly být charakterizovány unikátním profilem placentárně specifických miRNA v mateřské cirkulaci. Koncentraci a genovou expresi vybraných extracelulárních miRNA (miR-516-5p, miR-517*, miR-518b, miR-520a*, miR-520h, miR-525, miR-526a) jsem měřila v plazmě pacientek s preeklampsií (PE), fetální růstovou retardací (FGR) a gestační hypertenzí (GH). Kontrolní skupinu tvořily pacientky s fyziologickým průběhem gravidity (FG). Celkem jsem zpracovala 168 vzorků plazmy, zastoupení jednotlivých diagnóz bylo následující: PE 63, FGR 27, GH 23, FG 55. Detekce a kvantifikace probíhala metodou kvantitativní PCR v reálném čase. Identifikovala jsem tři miRNA, které se u pacientek s PE nacházely ve zvýšených hladinách. Jednalo se o miR-517*, miR-520a* a miR-525. Závažnost onemocnění, která byla charakterizována formou onemocnění (mírná nebo závažná PE) a termínem porodu (před nebo po 34. týdnu gravidity), neměla na hladiny miRNA statisticky významný vliv. U více než čtvrtiny pacientek se jednalo o PE superponovanou na předchozí hypertenzi, předchozí výskyt...

MicroRNAs (miRNAs) are small noncoding RNAs of length 18 to 25 nucleotides that regulate gene expression posttranscriptionally. Expression of some miRNAs is tissue specific. I assumed that pregnancy induced complications associated with placental insufficiency could be characterized by a unique profil of placental-specific miRNAs in maternal circulation. I measured concentration and gene expression of selected miRNAs (miR-516-5p, miR-517*, miR-518b, miR-520a*, miR-520h, miR-525 and miR-526a) in the plasma of patients with preeclampsia (PE), fetal growth restriction (FGR) and gestational hypertension (GH). The control group consisted of patients with a normal course of pregnancy (FG). I processed 168 plasma samples, the representation of individual diagnosis were as follows: PE 63, FGR 27, GH 23, FG 55. Detection and quantification was carried out by quantitative real-time PCR. I identified three miRNAs with elevated levels in a group of preeclamptic patients: miR-517*, miR-520a* and miR-525. The severity of the PE, which was characterized by a form of the disease (mild or severe PE) and term (before or after the 34th week of pregnancy), did not have a statistically significant effect on the levels of miRNAs. More than a quarter of patients had PE superimposed on previous hypertension. Previous history of...