Ovlivnění produkce explantátové kultury Trifolium pratense L. I

Abstract

1 ABSTRACT Kateřina Muráriková Influencing of production of plant tissue culture of Trifolium pratense L. I The aim of this thesis was to check the influence of cinnamic acid, as a precursor of the phenylpropanoids biosynthesis, on the flavonoids production of Trifolium pratense L. suspension culture, to compare two varieties of this plant, the DO-8 one and the Tempus one, in terms of the effect of this precursor, and to help achieve the successful increase of the production of secondary metabolites by the Trifolium pratense L. explant cultures. Concerning the DO-8 variety, the changes of the isoflavonoids production as a result of the cinnamic acid influence have been also tested. The suspension cultures were being cultivated on the Gamborg's nutrient medium with the addition of 2 mg.l-1 2,4-dichlorphenoxyacetic acid and 2 mg.l-1 6-benzylaminopurine. The cultivation was being realised on a slow moving roller at temperature of 25 řC and in the period of 16 hours of light and 8 hours of dark. The cinnamic acid was added in the four concentrations and its influence was observed after 6, 24, 48 and 168 hours. The flavonoids determination was being applied on the check samples and the samples with the addition of cinnamic acid by the spectrophotometric method in agreement with the Český lékopis 2009 and the...

1 ABSTRAKT Kateřina Muráriková Ovlivnění produkce explantátové kultury Trifolium pratense L. I Cílem této diplomové práce bylo ověřit vliv působení kyseliny skořicové, jakožto prekurzoru biosyntézy fenylpropanových látek, na produkci flavonoidů suspenzní kultury Trifolium pratense L., porovnat dvě variety této rostliny, varietu DO-8 a varietu Tempus, z hlediska působení tohoto prekurzoru a přispět tak k dosažení úspěšného zvýšení produkce sekundárních metabolitů explantátovými kulturami Trifolium pratense L. U variety DO-8 se také zjišťovaly změny v produkci isoflavonoidů vlivem působení kyseliny skořicové. Suspenzní kultury byly kultivovány na živném médiu dle Gamborga s přídavkem 2 mg.l-1 kyseliny 2,4-dichlorfenoxyoctové a 2 mg.l-1 6-benzylaminopurinu. Kultivace probíhala při 25 řC a světelné periodě 16 hodin světlo / 8 hodin tma na pomaloběžném roleru. Kyselina skořicová se přidávala ve čtyřech koncentracích a její vliv se sledoval po 6, 24, 48 a 168 hodinách. Stanovení flavonoidů se provádělo u kontrolních vzorků i vzorků s přídavkem kyseliny skořicové spektrofotometrickou metodou dle Českého lékopisu 2009 a stanovení isoflavonoidů metodou HPLC. Nejvyšší obsah flavonoidů, 0,4107 %, byl naměřen u kultury Trifolium pratense L., varieta DO-8, odebrané po 24 hodinách, na kterou po tuto dobu působila...