Explantátové kultury Trichocereus pachanoi

Abstract

Jednou z metod zvýšení produkce sekundárních metabolitů in vitro je ovlivnění explantátových kultur prekurzory. V této diplomové práci byl studován vliv prekurzorů na suspenzní kultury Trichocereus pachanoi vzhledem k produkci meskalinu. Jako prekurzory byly využity dopamin, D, L- tyrosin, hydrolyzát kaseinu a kyselina šikimová, které byly přidány do živného média ve třech různých koncentracích. Suspenzní kultury Trichocereus pachanoi s přidanými prekurzory byly pomocí HPLC metody analyzovány na přítomnost a obsah meskalinu po 48 a 168 hodinách. Kultury byly kultivovány na médiu definovaném dle Murashigeho a Skooga. Dopamin vykazoval pozitivní vliv na in vitro biosyntézu meskalinu. Nejvyšší produkce meskalinu byla analyzována u suspenzní kultury s in vitro koncentrací dopaminu 50 mg/100ml po 168 h kultivace. U kultur kultivovaných 48 h byl analyzován nejvyšší obsah meskalinu suspenzím s in vitro koncentrací dopaminu 50 mg/100ml. Ostatní prekurzory (D, L-tyrosin, hydrolyzát kaseinu a kyselina šikimová) vykazovaly na in vitro biosyntézu meskalinu inhibiční vliv.

Affecting tissue cultures with precursors is one of methods that increases the production of secondary metabolites in vitro. This thesis deals with precursors affecting production of mescaline in suspension tissue cultures of Trichocereus pachanoi. As precursors dopamine, D, L-tyrosine, casein hydrolysate and shikimic acid were used. Three concentrations of these precursors were prepared. Suspension cultures with different concentrations of precursors were analysed by HPLC method after 48 and 168 hours. Murashige and Skoog medium was used for cultivation. Mescaline biosynthesis was most affected by dopamine. The largest amount of mescaline was produced in suspension culture with the highest concentration of dopamine 50 mg/100 ml.The culture was cultivated for 168 hours. Suspension cultures that were cultivated for 48 hours produced the highest amount of mescaline with the highest concentration of dopamin 50 mg/100 ml. The biosynthesis of mescaline was inhibited by other precursores (D, L-tyrosine, casein hydrolysate, shikimic acid).