Sledování kinetiky inhibitorů acetylcholinesterasy in vitro

Abstract

Kateřina Janská Sledování kinetiky inhibitorů acetylcholinesteras in vitro Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Katedra biologických a lékařských věd Vedoucí práce: Doc. MUDr. Josef Herink, DrSc. Konzultant: PharmDr. Vendula Šepsová Cílem této práce bylo stanovit typ inhibice nově syntetizovaných AChEI a zjistit, jestli změna struktury AChEI ovlivňuje typ inhibice. Celkem bylo testováno 12 látek, 7 derivátů takrinu a 5 7-metoxytakrin-donepezilových derivátů. Inhibiční potenciál testovaných látek byl stanoven in vitro na lidské rekombinantní AChE. Měření bylo provedeno na spektrofotometru, Ellmanovou metodou. Byl stanoven nekompetitivní typ inhibice u látek EN 1-5, PC-25 a PC-33, smíšený typ inhibice u látek PC-48 a PC-49, akompetitivní typ inhibice u látek EN-6, EN-7 a kompetitivní typ inhibice u látky PC-37. Dle hodnot Ki bylo zjištěno, že největší inhibiční potenciál mají látky EN-7 a PC-37. Na základě KM byly určeny látky s největší afinitou k AChE, jimiž jsou PC-37 a PC-48. Poloha substituentů u PC látek a délka alkylačního řetězce u EN látek také ovlivňovala typ inhibice. Perspektivní látky EN-7 a PC-37, které prokazovaly největší potenciál inhibovat AChE a látky PC- 48 a PC-49, které jsou schopné se navázat do aktivního i periferního...

Kateřina Janská Evaluation of the kinetics of acetylcholinesterase inhibitors in vitro Diploma thesis Charles University in Prag, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Pharmacy Department of Biological and Medical Sciences Supervisor: Doc. MUDr. Josef Herink, DrSc. Consultant: PharmDr. Vendula Šepsová The aim of the thesis was to determine the type of an inhibition of newly synthesized AChEI and to find out if AChEI structure changes influence the type of an inhibition. Altogether 12 substances (7 tacrine hybrides and 5 7-methoxy- donepezil hybrids) were investigated. The inhibition potential of the tested substances was studied in vitro on the human recombinant AChE. Spectrophotometric Ellman method was utilized as the measurement tool. The noncompetitive type of an inhibition for substances EN 1-5, PC-25 and PC-33, mixed type of an inhibition for substances PC-48 and PC-49, uncompetitive type of an inhibition for substances EN-6, EN-7 and competitive type of an inhibition for the substance PC-37 was determined. The greatest inhibition potential according to Ki values were found for substances EN-7 and PC-37. Substances PC-37 and PC-48 were determined as substances with the biggest affinity to the AChE. The type of an inhibition has been influenced by a substituent position in PC substances and by...