Uplatnění moderních separačních technik v analýze biologického materiálu

Abstract

Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Katedra analytické chemie Kandidát Mgr Barbora Červinková Školitel prof. RNDr. Petr Solich, CSc. Název disertační práce Uplatnění moderních separačních technik v analýze biologického materiálu Předložená disertační práce se zabývá vývojem, optimalizací a validací nových chromatografických metod pro stanovení vitamínů A a E, biomarkerů zánětu a oxidačního poškození nukleových kyselin, včetně jejich extrakce z biologickém materiálu. V první teoretické části práce jsou blíže popsány jednotlivé analyty a možnosti jejich stanovení v biologickém materiálu, moderní trendy v kapalinové chromatografii a vybrané validační normy v bioanalýze. Dále je zde diskutována manipulace s biologickým materiálem od jeho odběru po zpracování v laboratoři - zejména problematika transportu a úpravy vzorku. Druhá část práce je rozdělena do dvou tematických okruhů věnovaných komentářům k publikovaným výstupům. V prvním okruhu jsou komentovány vyvinuté a publikované analytické metody. Jako první je komentována metoda zaměřená na stanovení lipofilních vitamínů v lidském séru pomocí miniaturizované LLE s následnou selektivní separací na fluorované stacionární fázi pomocí systému UHPLC s fluorescenční detekcí a časem analýzy 4 minuty. Následně je diskutováno...

Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Department of Analytical Chemistry Candidate Mgr. Barbora Červinková Supervisor prof. RNDr. Petr Solich, CSc. Title of Doctoral Thesis Application of modern separation techniques in the analysis of biological material The presented dissertation is focused on development, optimization and validation of new extraction procedures and chromatographic methods for determination of vitamins A and E, inflammation biomarkers, DNA and RNA oxidative stress products in biological matrices. In the theoretical part of this work selected analytes and possibility of their determination in biological materials are described. Moreover, modern trends in liquid chromatography and bioanalytical validation guidelines are included. In this part, special attention is focused on sample handling, transport and pre- treatment. The second part is focused on published methods and divided into two sections. The first section comments published developed analytical methods. As first method, determination of lipophilic vitamins in human serum by miniaturized liquid-liquid extraction with subsequent separation on fluorinated stationary phase using UHPLC system with fluorescent detection in 4 min is discussed. Thereafter, determination of creatinine, DNA and...