Carbohydrate recognition of the novel colonization factor CS30 of enterotoxigenic E. coli

Abstract

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutickej chémie a farmaceutickej analýzy Univerzita Göteborg Sahlgrenska Academy Ústav biomedicíny, Katedra lekárskej biochémie a bunečnej biológie, Katedra mikrobiológie a imunológie Študentka: Žofia Chrienová Školitelia: PharmDr. Marta Kučerová, Ph.D. Prof. Susann Teneberg, MD PhD Astrid von Mentzer, PhD Názov diplomovej práce: Rozpoznávanie nového kolonizačného faktora enterotoxigénnej E. coli CS30 sacharidmi Enterotoxigénna Escherichia coli (ETEC) je najčastejší patogén spôsobujúci hnačku u ľudí žijúcich a cestujúcich do rozvojových krajín. Rovnako spôsobuje hnačku u mnohých domácich zvierat. Dvomi hlavnými virulentnými faktormi ETEC sú enterotoxíny a proteíny exprimované na jej vonkajšej membráne, nazývané kolonizačné faktory, pomocou ktorých baktéria adheruje na povrch epiteliálnych buniek hostiteľa v tenkom čreve. Väzba nedávno objaveného kolonizačného faktoru CS30 na sacharidovú zložku jeho receptoru bola charakterizovaná pomocou väzbových testov so zmesou glykosfingolipidov izolovaných z tenkého čreva človeka a prasaťa. Látka viažuca sa na CS30, bola pomocou hmotnostnej spektrometrie identifikovaná ako zmes sulfatidov s rôznou ceramidovou časťou. Výsledky väzbových testov potvrdili preferencie CS30 ku...

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmaceutical Chemistry and Pharmaceutical Analysis University of Gothenburg Sahlgrenska Academy Institute of Biomedicine, Department of Medicinal Biochemistry and Cell Biology, Department of Microbiology and Immunology Student: Žofia Chrienová Supervisors: PharmDr. Marta Kučerová, Ph.D. Prof. Susann Teneberg, MD PhD Astrid von Mentzer, PhD Title of diploma thesis: Carbohydrate recognition of the novel colonization factor CS30 of enterotoxigenic E. coli Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) is a major cause of diarrhoea in developing countries and travellers to these areas, as well as in many farm animals. The main ETEC virulence factors are two enterotoxins and outer membrane proteins called colonization factors that mediate the adherence of the bacteria to the host epithelial cell surface in the small intestine. Carbohydrate recognition of the recently identified colonization factor CS30 was characterised using binding studies with the mixture of glycosphingolipids isolated from the human and porcine intestine. The CS30 binding compound was identified as a mixture of sulfatides with different ceramide species by mass spectrometry and a binding assay with monoclonal antibodies directed towards SO3-3Galβ. Further testing...