Zobrazit minimální záznam

Studies of CD44 glycoprotein activation by using the specific monoclonal antibody.
dc.contributor.advisorSemecký, Vladimír
dc.creatorFučíková, Jitka
dc.date.accessioned2017-04-04T11:15:20Z
dc.date.available2017-04-04T11:15:20Z
dc.date.issued2007
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.11956/10735
dc.description.abstractAML je akutní myeloidní leukémie charakterizovaná přítomností velkého množství myeloidních prekurzorů, které ztratily schopnost diferenciace. Navázání monoklonálních protilátek anti-CD44 na glykoprotein CD44 umožňuje diferenciaci leukemických blastů. CD44 glykoprotein je významný receptor pro hyaluronovou kyselinu a podílí se na buněčné adhezi a migraci. Pro pochopení mechanizmu myeloidní diferenciace pomocí specifických monoklonálních protilátek a k potvrzení hypotézy, jež předpokládá odštěpení úseku intracelulární části molekuly CD44 a migraci ICD do jádra, byly použity THP-1 a CHO buněčné linie transfektované molekulou CD44 značenou molekulou Myc Tag. Prvním úkolem bylo izolovat z ascitu protilátku H90 pomocí chromatografické kolony. Poté byla použita SDS PAGE elektroforéza k ověření čistoty izolované protilátky. Dále byla ověřena funkčnost protilátky. Výběr vhodných kmenů THP-1 a CHO buněk proběhl pomocí selektivního media a pomocí analýzy FACS. K analýze ICD oblasti značené tagem byla použita metoda Western Blot, jež se ukázala jako nedostatečně citlivá. Následně byla použita imunofluorescence se specifickými protilátkami proti Myc Tag. Konečné výsledky ukázaly možnost detekce molekuly ICD Myc v buněčném jádře po předchozím navázání monoklonální protilátky H90.cs_CZ
dc.description.abstractAcute myeloid leukemia (AML) is an heterogenous leukemia characterized by the blockage of myeloid differentiation at different stages. The ligation of CD44 with specifics monoclonal antibodies (MAbs) (A3D8 and H90), triggers terminal differentiation of leukemic blasts in AML-M1/2 to AML-M5 subtypes. The CD44 surface antigen is the most important hyaluronic acid receptor and is involved in cell adhesion and migration. To investigate the mechanism of myeloid differentiation due to CD44 specific monoclonal antibodies, and to confirmed our hypothesis on involvement of cleavage of intracellular domain of CD44 (ICD) and migration of ICD in the nucleus, we have used the THP-1 (AML-M5 subtype) cell line and the CHO cell line transfected with a CD44 molecule tagged in the C-terminal with the Myc Tag (CD44-Myc). In the first step we have purified ascite H90 MAb by affinity Protein G chromatography, followed by SDS PAGE electrophoresis to analyse the purity of MAb. In second step, we have performed differentiation assays of THP-1 to test the efficacity of the MAb. THP-1 and CHO cells have been selected for the highest CD44-Myc Tag expression after G418 antibiotic (geneticin) selection using FACS analysis. To analyse ICD Tagged (ICD-Myc) localisation in cells, we have first performed analysis of nuclear and cytoplasmic...en_US
dc.languageČeštinacs_CZ
dc.language.isocs_CZ
dc.publisherUniverzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Královécs_CZ
dc.titleStudium aktivace glykoproteinu CD44 pomocí specifické monoklonální protilátkycs_CZ
dc.typediplomová prácecs_CZ
dcterms.created2007
dcterms.dateAccepted2007-06-04
dc.description.departmentKatedra biologických a lékařských vědcs_CZ
dc.description.departmentDepartment of Biological and Medical Sciencesen_US
dc.description.facultyFaculty of Pharmacy in Hradec Královéen_US
dc.description.facultyFarmaceutická fakulta v Hradci Královécs_CZ
dc.identifier.repId17839
dc.title.translatedStudies of CD44 glycoprotein activation by using the specific monoclonal antibody.en_US
dc.contributor.refereeHerink, Josef
dc.identifier.aleph000800938
thesis.degree.nameMgr.
thesis.degree.levelmagisterskécs_CZ
thesis.degree.disciplineFarmaciecs_CZ
thesis.degree.disciplinePharmacyen_US
thesis.degree.programPharmacyen_US
thesis.degree.programFarmaciecs_CZ
uk.thesis.typediplomová prácecs_CZ
uk.taxonomy.organization-csFarmaceutická fakulta v Hradci Králové::Katedra biologických a lékařských vědcs_CZ
uk.taxonomy.organization-enFaculty of Pharmacy in Hradec Králové::Department of Biological and Medical Sciencesen_US
uk.faculty-name.csFarmaceutická fakulta v Hradci Královécs_CZ
uk.faculty-name.enFaculty of Pharmacy in Hradec Královéen_US
uk.faculty-abbr.csFaFcs_CZ
uk.degree-discipline.csFarmaciecs_CZ
uk.degree-discipline.enPharmacyen_US
uk.degree-program.csFarmaciecs_CZ
uk.degree-program.enPharmacyen_US
thesis.grade.csVýborněcs_CZ
thesis.grade.enExcellenten_US
uk.abstract.csAML je akutní myeloidní leukémie charakterizovaná přítomností velkého množství myeloidních prekurzorů, které ztratily schopnost diferenciace. Navázání monoklonálních protilátek anti-CD44 na glykoprotein CD44 umožňuje diferenciaci leukemických blastů. CD44 glykoprotein je významný receptor pro hyaluronovou kyselinu a podílí se na buněčné adhezi a migraci. Pro pochopení mechanizmu myeloidní diferenciace pomocí specifických monoklonálních protilátek a k potvrzení hypotézy, jež předpokládá odštěpení úseku intracelulární části molekuly CD44 a migraci ICD do jádra, byly použity THP-1 a CHO buněčné linie transfektované molekulou CD44 značenou molekulou Myc Tag. Prvním úkolem bylo izolovat z ascitu protilátku H90 pomocí chromatografické kolony. Poté byla použita SDS PAGE elektroforéza k ověření čistoty izolované protilátky. Dále byla ověřena funkčnost protilátky. Výběr vhodných kmenů THP-1 a CHO buněk proběhl pomocí selektivního media a pomocí analýzy FACS. K analýze ICD oblasti značené tagem byla použita metoda Western Blot, jež se ukázala jako nedostatečně citlivá. Následně byla použita imunofluorescence se specifickými protilátkami proti Myc Tag. Konečné výsledky ukázaly možnost detekce molekuly ICD Myc v buněčném jádře po předchozím navázání monoklonální protilátky H90.cs_CZ
uk.abstract.enAcute myeloid leukemia (AML) is an heterogenous leukemia characterized by the blockage of myeloid differentiation at different stages. The ligation of CD44 with specifics monoclonal antibodies (MAbs) (A3D8 and H90), triggers terminal differentiation of leukemic blasts in AML-M1/2 to AML-M5 subtypes. The CD44 surface antigen is the most important hyaluronic acid receptor and is involved in cell adhesion and migration. To investigate the mechanism of myeloid differentiation due to CD44 specific monoclonal antibodies, and to confirmed our hypothesis on involvement of cleavage of intracellular domain of CD44 (ICD) and migration of ICD in the nucleus, we have used the THP-1 (AML-M5 subtype) cell line and the CHO cell line transfected with a CD44 molecule tagged in the C-terminal with the Myc Tag (CD44-Myc). In the first step we have purified ascite H90 MAb by affinity Protein G chromatography, followed by SDS PAGE electrophoresis to analyse the purity of MAb. In second step, we have performed differentiation assays of THP-1 to test the efficacity of the MAb. THP-1 and CHO cells have been selected for the highest CD44-Myc Tag expression after G418 antibiotic (geneticin) selection using FACS analysis. To analyse ICD Tagged (ICD-Myc) localisation in cells, we have first performed analysis of nuclear and cytoplasmic...en_US
uk.file-availabilityV
uk.publication.placeHradec Královécs_CZ
uk.grantorUniverzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra biologických a lékařských vědcs_CZ
dc.identifier.lisID990008009380106986


Soubory tohoto záznamu

Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail

Tento záznam se objevuje v následujících sbírkách

Zobrazit minimální záznam


© 2017 Univerzita Karlova, Ústřední knihovna, Ovocný trh 560/5, 116 36 Praha 1; email: admin-repozitar [at] cuni.cz

Za dodržení všech ustanovení autorského zákona jsou zodpovědné jednotlivé složky Univerzity Karlovy. / Each constituent part of Charles University is responsible for adherence to all provisions of the copyright law.

Upozornění / Notice: Získané informace nemohou být použity k výdělečným účelům nebo vydávány za studijní, vědeckou nebo jinou tvůrčí činnost jiné osoby než autora. / Any retrieved information shall not be used for any commercial purposes or claimed as results of studying, scientific or any other creative activities of any person other than the author.

DSpace software copyright © 2002-2015  DuraSpace
Theme by 
@mire NV