Vliv inhibice belinostatu na aktivitu vybraných reduktas z nadrodiny AKR a SDR.

Abstract

Charles University Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Bc. Adéla Slámová Supervisor: prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. Title of diploma thesis: The influence of belinostat inhibition on the activity of selected reductases from AKR and SDR superfamilies Anthracycline antibiotics (ANTs) are important antineoplastic agents. One of them, daunorubicin (DAUN), is used for the treatment of acute leukaemia and other malignancies in children and adults. Factors limiting its clinical use include mainly resistance and cardiotoxicity. Enzymes from aldo-keto reductase (AKR) and short-chain dehydrogenase/reductase (SDR) superfamilies mediated the reduction of DAUN to its C-13 alcohol metabolite daunorubicinol (DAUNOL). The metabolite is more cardiotoxic, less antineoplastic, and is causing anthracycline resistance. This diploma thesis aimed to examine the inhibitory effect of belinostat on the activity of AKR1A1, 1B1, 1B10, 1C3, and CBR1. The specific enzyme activity and inhibitory potential were estimated in vitro using recombinant enzymes, and the enzymatic production of DAUNOL was evaluated by the liquid chromatography (UHPLC) system. The inhibition was decreased in order AKR1C3  AKR1B10  AKR1A1  AKR1B1  CBR1. The most inhibited enzyme, AKR1C3, expressed 50,7%...

Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Adéla Slámová Školitel: prof. Ing. Vladimír Wsól, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv inhibice belinostatu na aktivitu vybraných reduktas z nadrodiny AKR a SDR Antracyklinová antibiotika (ANT) jsou významná protinádorová léčiva. Jedním z nich je daunorubicin (DAUN), který se používá v léčbě akutních leukémií a jiných malignit u dětí i dospělých. Mezi faktory limitující jeho klinické použití patří rezistence a kardiotoxicita. Enzymy z nadrodiny aldo-ketoreduktáz (AKR) a dehydrogenáz/reduktáz s krátkým řetězcem (SDR) katalyzují redukci DAUN na C-13 alkoholový metabolit daunorubicinol (DAUNOL). Ten má vyšší kardiotoxicitu, menší antineoplastickou aktivitu a je zodpovědný mimo jiné za ANT rezistenci. Cílem této diplomové práce bylo zjistit inhibiční účinek belinostatu na aktivitu AKR1A1, 1B1, 1B10, 1C3 a CBR1. Specifická enzymová aktivita a inhibiční potenciál byly posouzeny na úrovni in vitro pomocí rekombinantních enzymů a enzymatická tvorba DAUNOL byla hodnocena pomocí kapalinové chromatografie (UHPLC). Míra inhibice klesala v pořadí AKR1C3  AKR1B10  AKR1A1  AKR1B1  CBR1. Nejvíce inhibovaný enzym AKR1C3 vykazoval 50,7% inhibici 10M belinostatem a 89,2% inhibici 50M belinostatem. V porovnání s...